[发明专利]一种巴氏杆菌培养基及其制备鉴别方法有效
申请号: | 201710607848.4 | 申请日: | 2017-07-24 |
公开(公告)号: | CN107400643B | 公开(公告)日: | 2019-12-13 |
发明(设计)人: | 王雷;郅永伟;李振海;薛家兵 | 申请(专利权)人: | 内蒙古东达獭兔循环产业研究院;内蒙古东达生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12Q1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 11453 北京名华博信知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李冬梅;苗源 |
地址: | 014300 内蒙古自治区*** | 国省代码: | 内蒙;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 杆菌 培养基 及其 制备 鉴别方法 | ||
1.一种巴氏杆菌培养基,其特征在于,所述巴氏杆菌培养基由动物肉粉、NaCl、血液、甘露醇、水、抑菌剂、指示剂与显色剂组成;其中,各组分的含量为:
所述抑菌剂为万古霉素;所述指示剂为硫代硫酸钠与硫酸亚铁的混合物,所述硫代硫酸钠与所述硫酸亚铁的比为3:2;所述显色剂为中性红;所述动物肉粉为兔肉粉,所述血液为兔鲜血。
2.如权利要求1所述巴氏杆菌培养基,其特征在于,所述巴氏杆菌培养基由动物肉粉、NaCl、血液、甘露醇、水、抑菌剂、指示剂以及显色剂组成;其中,各组分的含量为:
3.如权利要求1所述的巴氏杆菌培养基,其特征在于,所述巴氏杆菌培养基还包括琼脂,所述琼脂含量为15~25g。
4.一种如权利要求1-3任一所述巴氏杆菌培养基制备方法,其特征在于,所述制备方法包括下述步骤:
A1)取0.7~1.3L的水加入烧杯中,取兔肉粉25~35g,NaCl 3~7g,甘露醇5~15g,溶解于水中并搅拌均匀,得到混合均匀的混合液;
A2)在混合液中加入pH调节剂,将混合液的pH值调节至6.8~7.5;
A3)将调节pH值后的混合溶液,分装于3~5个相同的容器中,将分装到容器中的混合溶液在115℃~125℃,101~102KPa的条件下高温灭菌15~25分钟,得到高温灭菌后的混合溶液;
A4)将高温灭菌后的混合溶液在44~55℃的无菌环境中进行冷却后,移至超净工作台,在每个容器中均加入兔鲜血15~28mL,得到巴氏杆菌培养基;
或A5)将步骤A4)所得的巴氏杆菌培养基置于超净工作台中,在每个容器中均加入过滤灭菌后的万古霉素0.001~0.005g,硫代硫酸钠0.045~0.42g,硫酸亚铁0.03~0.28g,中性红2-5mL,得到含有抑菌剂、指示剂以及显色剂的巴氏杆菌培养基。
5.如权利要求4所述巴氏杆菌培养基制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括下述步骤:
在步骤A2)将混合液的pH值调节至6.8~7.5后,加入琼脂15~25g。
6.如权利要求4所述的巴氏杆菌培养基制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括制备兔肉粉的步骤:
所述制备兔肉粉的步骤还包括:
B1)取生兔肉25~35g,加水煮沸8~12min去除动物肉油脂后,研磨成肉糊;所得肉糊中添加蛋白酶0.2~0.4万U/g,搅拌均匀,将搅拌均匀的肉糊置于55~65℃下保温11~13小时得到保温后的肉糊,对保温后的肉糊进行加水煮沸12~17min使保温后的肉糊中的蛋白酶失活,并形成兔肉液;
B2)将步骤B1)获得的兔肉液进行离心处理,去掉残渣和油,获得兔肉浆,将动物肉浆干燥形成兔肉粉。
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