[发明专利]一种细菌营养培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种用于制备细菌营养培养基的方法，其特征在于，所述细菌为导致兔发病的病原菌，所述制备方法包括下述步骤：

步骤1，制备兔肉粉；

步骤2，取0.6～1.0L的水加入烧杯中，量取兔肉粉25～35g，NaCl 3～7g，柠檬酸钠1～3g，葡萄糖5～15g，乳糖5～15g，甘露醇5～15g溶解于水中并搅拌均匀，得到混合均匀的混合液，然后量取琼脂15～25g加入混合液中，在90℃～98℃下对混合液加热至琼脂完全融化，并在此加热过程中不断搅拌混合液；

步骤3，在步骤2中所得的加入琼脂的混合液中补加水0.1～0.3L，然后加入pH调节剂，将混合液的pH值调节至6.8～7.5；

步骤4，将步骤3所得调节PH值之后的混合溶液在120℃～122℃，101～102KPa的条件下高温灭菌18～22分钟，得到高温灭菌后的混合溶液；

步骤5，将步骤4中高温灭菌后的混合溶液冷却至44℃～55℃，加入兔鲜血75～85ml搅拌均匀得到所述细菌营养培养基。

2.如权利要求1所述的细菌营养培养基制备方法，其特征在于，所述制备兔肉粉的步骤还包括：

步骤11，取生兔肉140～160g，加水150～200ml煮沸8～12分钟，去水研磨成肉糊；

步骤12，在步骤11所得肉糊中添加蛋白酶搅拌均匀，将搅拌均匀的肉糊置于55～65℃下保温11～13小时得到保温后的肉糊，对保温后的肉糊加水300～500ml进行水煮煮沸12～17分钟使保温后的肉糊中的蛋白酶失活，并形成兔肉浆液；

步骤13，将步骤12中获得的兔肉浆液在离心机中以2800～3200转/分钟的转速离心处理4～6分钟，过滤掉残渣和油，得到过滤后的兔肉浆液，将所述过滤后的兔肉浆液干燥形成兔肉粉。

3.如权利要求2所述的细菌营养培养基制备方法，其特征在于，所述蛋白酶用量为0.29～0.31万U/g。

4.如权利要求1或2所述的细菌营养培养基制备方法，其特征在于，所述制备方法包括下述步骤：

步骤1，制备兔肉粉；

步骤2，取0.8L的水加入烧杯中，量取兔肉粉30g，NaCl 5g，柠檬酸钠2g，葡萄糖10g，乳糖10g，甘露醇10g溶解于水中并搅拌均匀，得到混合均匀的混合液，然后量取琼脂20g加入混合液中，在95℃下对混合液加热至琼脂完全融化，并在此加热过程中不断搅拌混合液；

步骤3，在步骤2中所得的加入琼脂的混合液中补加水0.2L，然后加入pH调节剂，将混合液的pH值调节至7.2；

步骤4，将步骤3所得调节PH值之后的混合溶液在121℃，101KPa的条件下高温灭菌20分钟，得到高温灭菌后的混合溶液；

步骤5，将步骤4中高温灭菌后的混合溶液冷却至50℃，加入兔鲜血80ml搅拌均匀得到所述细菌营养培养基。

5.如权利要求4所述的细菌营养培养基制备方法，其特征在于，所述制备兔肉粉的步骤还包括：

步骤11，取生兔肉30g，加水170ml煮沸10分钟，去水研磨成肉糊；

步骤12，在步骤11所得肉糊中添加蛋白酶搅拌均匀，将搅拌均匀的肉糊置于60℃下保温12小时得到保温后的肉糊，对保温后的肉糊加水400ml进行煮沸15分钟使保温后的肉糊中的蛋白酶失活，并形成兔肉浆液；

步骤13，将步骤12中获得的兔肉浆液在离心机中以3000转/分钟的转速离心处理5分钟，过滤掉残渣和油，得到过滤后的兔肉浆液，将所述过滤后的兔肉浆液干燥形成兔肉粉。

6.如权利要求4所述的细菌营养培养基制备方法，其特征在于，所述蛋白酶用量为0.3万U/g。

7.如权利要求1所述的用于制备细菌营养培养基的方法，其特征在于，所述pH调节剂包括碱性调节剂或酸性调节剂，其中所述碱性调节剂包括NaHCO₃、NaOH中的至少一种，所述酸性调节剂包括HCl。

8.一种如权利要求1～7中任一项所述方法制备的细菌营养培养基，其特征在于，所述细菌为导致兔发病的病原菌，所述细菌营养培养基包括兔肉粉、NaCl、柠檬酸钠、葡萄糖、乳糖、甘露醇、兔鲜血、水以及琼脂；其中，各组分的含量为：

。

9.如权利要求8所述细菌营养培养基，其特征在于，所述细菌营养培养基包括兔肉粉、NaCl、柠檬酸钠、葡萄糖、乳糖、甘露醇、兔鲜血、水以及琼脂；其中，各组分的含量为：

。