[发明专利]用于控制欧洲玉米螟的包含CRY1Ab和CYR2Aa的杀虫蛋白组合

说明书

本申请是2010年12月16日提交的申请号为201080064008.4(PCT申请号为PCT/US2010/060831)、发明名称为“用于控制欧洲玉米螟的包含CRY1Ab和CYR2Aa的杀虫蛋白组合，和管理昆虫抗性的方法”的发明专利申请的分案申请。

发明背景

人类种植玉米以用于食物和能量的供应。昆虫吃并损害植物从而破坏这些人类的努力。

目前已经通过植物表达编码来自苏云金芽孢杆菌的Cry1Fa蛋白的晶体(Cry)内毒素基因而实现了这些害虫的植物内转基因控制。Cry1Fa是目前Dow AgroSciences的Herculex^TM品牌下的转基因玉米种子(Herculex，Herculex-Extra，和Herculex-RW)中的毒素蛋白，其对FAW和ECB昆虫害虫有抗性。该蛋白通过结合至位于昆虫中肠内的特定受体并在肠细胞上形成孔而起作用。这些孔的形成阻止昆虫调节渗透压平衡并导致其死亡。

然而，存在一些情况，即昆虫可能能够通过其肠道中结合Cry1Fa的受体的遗传改变而发展对Cry1Fa活性的抗性。产生具有降低的结合Cry1Fa能力的受体的昆虫会对Cry1Fa的活性有抗性，从而在表达该蛋白的植物中存活。

当植物在生长状态期间持续表达单一的Cry毒素时，有这种情况，即昆虫可以通过昆虫肠道内的结合Cry1Fa毒素的受体的遗传改变而发展对该蛋白的活性的抗性。由受体的这些改变而引起的毒素结合的降低会导致Cry1Fa毒性的降低，并可能导致最终作物中表达的蛋白的效力降低。

发明概述

本发明部分地涉及叠加Cry1Ab蛋白和Cry2Aa蛋白以使得植物(特别是玉米)(corn or maize)更持久并更少的倾向于允许昆虫发展对这两种毒素的任意一种的活性的抗性。这些叠加可以特别用于靶标欧洲玉米螟(ECB)。

具体而言，本申请提供如下各项：

具体而言，本申请提供如下各项：

1.转基因植物，其包含编码Cry1Ab杀虫蛋白的DNA和编码Cry2Aa杀虫蛋白的DNA。

2.项1的转基因植物，所述植物进一步包含编码第三种杀虫蛋白的DNA，所述第三种蛋白选自Cry1Fa、Cry1Be、Cry1I和DIG-3。

3.项2的转基因植物，其中所述第三种蛋白选自Cry1Fa和Cry1Be，所述植物进一步包含编码选自Cry1Ca、Cry1Da、Cry1E和Vip3Ab的第四种和第五种杀虫蛋白的DNA。

4.根据项1-3任意一项的植物的种子，其中所述种子包含所述DNA。

5.植物田地，包含非-Bt避难所植物和多个项1-3任意一项的植物，其中所述避难所植物占(comprise)所述田地中所有作物植物的少于40％。

6.项5的植物田地，其中所述避难所植物占所述田地中所有作物植物的少于30％。

7.项5的植物田地，其中所述避难所植物占所述田地中所有作物植物的少于20％。

8.项5的植物田地，其中所述避难所植物占所述田地中所有作物植物的少于10％。

9.项5的植物田地，其中所述避难所植物占所述田地中所有作物植物的少于5％。

10.项5的植物田地，其中所述避难所植物是块状或条带。

11.种子混合物，包含来自非-Bt避难所植物的避难所种子，和多个项4的种子，其中所述避难所种子占混合物中全部种子的少于40％。

12.项11的种子混合物，其中所述避难所种子占混合物中全部种子的少于30％。

13.项11的种子混合物，其中所述避难所种子占混合物中全部种子的少于20％。

14.项11的种子混合物，其中所述避难所种子占混合物中全部种子的少于10％。

15.项11的种子混合物，其中所述避难所种子占混合物中全部种子的少于5％。

16.管理昆虫对Cry毒素的形成抗性的方法，所述方法包含种植种子以产生项5的植物田地。

17.项5-10中任意一项的田地，其中所述植物占地超过10英亩。

18.项1-3中任意一项的植物，其中所述植物选自玉米、大豆和棉花。

19.项18的植物，其中所述植物是玉米植物。