[发明专利]双特异性抗体及其制备方法与用途

权利要求书

1.一种双特异性抗体，其结构通式表示为K1-L-K2，所述双特异性抗体包含完整双链抗体K1、单链抗体K2以及连接肽L，且组成所述双特异性抗体的各部分自N端至C端首尾依次相连，双链抗体K1的重链通过连接肽L与单链抗体K2相连，其特征在于，所述连接肽L由柔性肽和刚性肽组成，所述连接肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，所述完整双链抗体K1重链的氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示，其轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO：19所示，且单链抗体K2的氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示。

2.如权利要求1所述的双特异性抗体在制备用于抑制肿瘤生长的药物中的用途，其中所述肿瘤为淋巴瘤。

3.制备如权利要求1所述双特异性抗体的方法，其特征在于，所述方法包括使所述完整双链抗体K1和单链抗体K2通过所述连接肽L连接的步骤。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(a)将编码所述双特异性抗体的完整双链抗体K1和单链抗体K2的DNA序列通过连接肽L的DNA序列连接组成融合基因；

(b)将步骤(a)中获得的融合基因引入DHFR酶缺陷型CHO宿主细胞；

(c)培养步骤(b)筛选到的高产量表达宿主细胞，表达双特异性抗体；

(d)收获步骤(c)得到的发酵液，并分离纯化双特异性抗体。