[发明专利]一种荧光纳米分子印记仿生传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.荧光纳米分子印迹仿生传感器在制备肝癌诊断试剂盒中的应用，其特征在于所述荧光纳米分子印迹仿生传感器由以下方法制得：（1）取1.051 g柠檬酸和335 μL乙二胺加入到20 mL超纯水中，搅拌溶解；将所得的溶液转移至50 mL聚四氟乙烯高压釜中，200℃反应5h；自然冷却到室温，纯水透析48 h，冷冻干燥12 h，得到碳点，备用；（2）20 mg 碳点粉末超声分散于15 mL pH=5磷酸盐缓冲溶液中，再依次加入200 μL 1 M EDC和NHS，磁力搅拌反应20 min ；将300 μL 0.25 M 4-乙烯基苯胺加入上述溶液进行共价缩合反应，磁力搅拌反应4 h；反应完成后，反应液透析48 h；最后冷冻干燥12 h，得到表面双键化修饰的碳点，备用；（3）取1.25 mg/mL AFP 320 μL、0.5 mmol NIPAAm和0.5 mmol 4-VPBA加入到15 mL 纯水中，超声溶解，通氮除氧，25℃下磁力搅拌预聚合50 min；将20 mg 表面双键化修饰的碳点粉末分散于15 mL 纯水中；然后将预聚合的溶液与表面双键化修饰的碳点溶液混合，加入0.5 mmol N,N-亚甲基双丙烯酰胺和13.25 mg过硫酸钾，通氮除氧15 min，磁力搅拌，60℃聚合反应4 h；10000 rpm离心5 min，收集沉淀，纯水洗涤5次；最后用10% (v/v) HAc-10%(w/v) SDS洗脱模板蛋白，直至印迹仿生传感器和非印迹仿生传感器荧光几乎相同为止；将所得到的产物冻干，得到荧光纳米分子印迹仿生传感器。