[发明专利]心肌梗死生物标志物miR‑1283

说明书

技术领域

本发明涉及疾病诊断治疗领域，具体的涉及心肌梗死生物标志物miR-1283，更具体的涉及miR-1283及其靶基因在诊治心肌梗死中的应用。

背景技术

急性心肌梗死(AMI)是最严重的一种心血管疾病，早期、准确的诊断可以保证再灌注治疗的立即开始可能减少死亡率。一些生物标志物如心肌肌钙蛋白I已应用与诊断AMI，可提高目前诊断，为急性心肌梗死的新方法。然而，miRNA在急性心肌梗死的表达和可能的作用是研究较少，以往的研究表明miR-30a是与心肌肥厚相关，miR-195的靶基因调节细胞凋亡，细胞增殖和细胞周期，他们可作为诊断急性心肌梗死生物标志物的潜在临床价值，但是这些还远远不够，临床的精准诊断和治疗需要更多候选分子标志物。

现有研究显示miR-1283的前体与HBV相关肝癌的易感性显著相关(miRNA-SNPs的遗传关联研究以及肝癌的整合生物学研究，2011博士论文，中国人民解放军军事医学科学院)，此外，miR-1283在非结核分枝杆菌感染者血浆中低表达，是潜在的用以鉴别结核分枝杆菌感染和结核分枝杆菌感染的分子标志物(结核与非结核分枝杆菌感染者血浆中差异表达microRNAs筛选，现代预防医学，2016)。本发明基于高通量测序方法，获得心肌梗死miRNA和mRNA的表达数据，同时，结合GEO数据库中心肌梗死相关miRNA和mRNA数据，进行生物信息学分析验证，从候选的miRNA和mRNA中挑选出miR-1283及其靶基因进行分子生物学验证，结果显示，miR-1283及其靶基因与心肌梗死密切相关。可用于心肌梗死的临床诊断及预防检测，为临床上相关诊断试剂研发奠定基础。

发明内容

检测miR-1283的制剂在制备诊断心肌梗死试剂中的应用。

所述miR-1283的序列见序列表SEQ ID NO 1。

进一步，诊断心肌梗死试剂包括基于高通量测序方法和/或基于定量PCR方法和/或基于探针杂交方法检测样本中miR-1283。

优选采用northern杂交方法、miRNA表达谱芯片、核酶保护分析技术、RAKE法、原位杂交、基于微球的流式细胞术检测样本中miR-1283的转录。

所述的样本为外周血。

优选的，基于定量PCR方法包括特异性扩增miR-1283的引物，进一步优选，特异性扩增miR-1283的引物序列为SEQ ID NO 2；基于探针杂交方法包括与miR-1283的核酸序列杂交的探针。

本发明的目的在于提供miR-1283的靶基因在制备诊断心肌梗死制剂中的应用。

所述靶基因为DIANA-MICROT、MICRORNA.ORG、MIRDB、RNA22-HAS、TARGETMINER、TARGETSCAN-VERT数据库公开的miR-1283靶基因。

优选的，所述靶基因为HDAC4、PHC2、THOC5、IL17RA。

进一步，诊断心肌梗死试剂包括基于高通量测序方法和/或基于定量PCR方法和/或基于探针杂交方法检测样本miR-1283靶基因的转录或基于免疫检测方法检测样本中miR-1283靶基因的表达情况。

优选采用northern杂交方法、miRNA表达谱芯片、核酶保护分析技术、RAKE法、原位杂交、基于微球的流式细胞术检测样本中miR-1283靶基因的转录；采用ELISA和/或胶体金试纸条检测样本中miR-1283靶基因的表达情况。

本发明的目的在于提供上调miR-1283的转录和/或促进miR-1283的活性的试剂在制备防治心肌梗死制剂中的应用。

优选的，采用基于RNA的microRNA功能获得性技术和/或基因特异性miR Mimics技术上调miR-1283的转录和/或促进miR-1283的活性。优选人工合成短发夹RNA或通过调控启动子上调miR-1283。

本发明的目的在于提供miR-1283的靶基因的抑制剂在制备防治心肌梗死制剂中的应用。

本发明的目的在于提供一种心肌梗死诊断试剂，心肌梗死诊断试剂能够检测心肌梗死样本中miR-1283的转录或免疫检测方法检测心肌梗死样本中miR-1283调控的靶基因的表达情况。

进一步，心肌梗死诊断试剂包括检测miRNA调控的靶基因HDAC4、PHC2、THOC5、IL17RA表达的特异性引物。

本发明的目的在于提供上述防治心肌梗死的制剂在制备心肌梗死治疗药物或试剂中的应用。

定义：