[发明专利]一种利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法在审
| 申请号： | 201710584381.6 | 申请日： | 2017-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN107190086A | 公开（公告）日： | 2017-09-22 |
| 发明（设计）人： | 董秋月 | 申请（专利权）人： | 杭州更蓝生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/10;C12R1/42 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310052 浙江省杭州市滨江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 生物 分析 检测 肠炎 沙门氏菌 方法 | ||
1.一种利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待测肠炎沙门氏菌菌株的DNA；
(2)以提取的肠炎沙门氏菌菌株的DNA作为模板进行PCR反应；
(3)将凝胶基质与染料混合物按照一定质量比混合均匀，过滤；
(4)将凝胶染料混合物注入分离芯片中，将marker加入样品孔中；
(5)将步骤(2)中的PCR产物加入样品孔中，将ladder加入指定的ladder孔中；
(6)将芯片涡旋混匀后放入生物分析仪中进行自动检测分析。
2.根据权利要求1所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(2)中PCR反应所用的引物序列为：
Sal-3a：5’-TATCGCCACGTTCGGGCAA-3’；
Sal-4a：5’-TCGCACCGTCAAAGGAACC-3’。
3.根据权利要求1所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(2)中PCR反应条件为：首先，94℃变性3min，之后进行25～30个扩增循环，扩增循环程式设定为94℃变性30s、70℃退火30s、72℃延伸1min。
4.根据权利要求3所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(2)PCR扩增循环后72℃延伸5min，PCR产物于4℃保存。
5.根据权利要求1所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(3)中凝胶基质和染料混合物的混合质量比为15:1～20:1。
6.根据权利要求5所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(3)中凝胶基质与染料混合物混合均匀后，用离心过滤器过滤。
7.根据权利要求1所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(4)中加入的marker的质量为1～5μL。
8.根据权利要求1所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(5)中加入的PCR产物的质量与加入的ladder的质量相同。
9.根据权利要求1所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(6)中的生物分析仪为Agilent 2100生物分析仪。
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