[发明专利]一种细胞组合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种细胞组合物及其制备方法和应用。

背景技术

克罗恩病是一种原因不明的肠道炎症性疾病，作为炎症性肠病的主要类型，具有病程长、易复发、可侵及胃肠道任何部位和不易根治等特点。克罗恩病是一种消化道的慢性、反复发作和非特异性的透壁性炎症，病变呈节段性分布，可累及消化道任何部位，其中以末端回肠最为常见，结肠和肛门病变也较多。目前克罗恩病的治疗主要采用糖皮质激素和免疫抑制剂作为治疗药物，该法只能起到缓解病情的作用，无法有效的阻止病情的发展，更不能根治克罗恩病；而且长时间使用糖皮质激素药物会诱发如骨质疏松、高血压、高血糖和向心性肥胖等并发症，同时免疫抑制剂的长期使用，也会引起机体免疫系统失衡。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种适用于克罗恩病患者的细胞组合物，用于修复肠道炎症并抑制病情恶化。其具体技术方案如下：

本发明提供了一种细胞组合物，包括：调节性T细胞、肠道干细胞和IL-33。

优选的，所述调节性T细胞的细胞密度为1×10⁷～5×10⁷个/mL。

优选的，所述肠道干细胞的细胞密度为5×10⁶～1×10⁷个/mL。

优选的，所述IL-33的工作浓度为10～50ng/mL。

优选的，所述肠道干细胞为第三代至第五代肠道干细胞。

优选的，所述细胞组合物的剂型为注射制剂。

更优选的，所述注射制剂的溶媒为生理盐水。

本发明还提供了一种上述细胞组合物的制备方法，将调节性T细胞、肠道干细胞和IL-33混合，得到所述细胞组合物。

本发明还提供了上述细胞组合物或上述制备方法得到的细胞组合物在制备克罗恩病药物中的应用。

综上所述，本发明所提供的细胞组合物包括调节性T细胞、肠道干细胞和 IL-33，以调节性T细胞和肠道干细胞作为活性细胞，实现在修复患者肠道炎症的同时还能调节免疫系统去抑制自身过度免疫，防止病情恶化，广泛适用于克罗恩病患者；本发明细胞组合物添加有细胞因子IL-33，各组分协同增效，共同促进克罗恩病患肠道炎症的修复，治疗效果显著。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

1)本发明细胞组合物中包含肠道干细胞，这些细胞能直接分化形成新的肠道组织，替换并修复损伤的组织，从本质上进行治疗；

2)本发明细胞组合物中的调节性T细胞、肠道干细胞和IL-33用于调节病患自身的免疫系统，避免因自身免疫过度而失效，保证本发明细胞组合物的疗效；

3)本发明细胞组合物优选为注射制剂，采用生理盐水作为溶媒，生理盐水与人体组织的渗透压一直，避免对病患肠道组织产生损伤；

4)本发明细胞组合物为低温保存制剂，既可避免细胞因子失活，又能很好的保持肠道干细胞和调节性T细胞的生物活性，疗效稳定。

具体实施方式

为了提供一种适用于克罗恩病患者的细胞组合物，用于修复肠道炎症并抑制病情恶化。本发明提供了一种细胞组合物，包括：调节性T细胞(Treg细胞)、肠道干细胞和IL-33。

克罗恩病虽为良性疾病，至今仍缺乏十分有效的治疗手段，而且其具体的发病机制尚不完全清楚，目前可以确定的是机体免疫功能紊乱是导致其发生发展的主要原因之一。克罗恩病的发明机制从免疫学角度可认为克罗恩病是由Th1细胞和Th17细胞过度激活以及活化，导致Treg细胞缺乏为特点的肠道疾病。

肠道干细胞主要位于肠黏膜上皮Lieberkunn's隐窝中，潘氏细胞上方，具备干细胞的终生自我更新与分化的基本特征。当受到外界生理或病理的信号作用后，肠道干细胞进行非对称分裂，形成一个原代干细胞和一个分化了定向祖细胞，定向祖细胞可进一步分化为具有特殊结构和功能的终末分化细胞，如：吸收细胞、杯状细胞、潘氏细胞、M细胞、内分泌细胞等，修复并重建小肠黏膜上皮屏障和消化吸收功能，肠道干细胞的这种潜能对肠道损伤后的修复十分关键。目前，国内肠道疾病常见，肠道黏膜，甚至黏膜下肌层的结构和功能受到破坏，通过干细胞技术和组织工程技术定向诱导肠道干细胞使其分化为特定的细胞以替代功能障碍的细胞或组织缺损，这可能是治疗克罗恩病的一种潜在的有效方法。本发明细胞组合物中包含肠道干细胞，这些细胞能直接分化形成新的肠道组织，替换并修复损伤的组织，从本质上进行治疗。