[发明专利]稻米锰含量简易快速测定法

说明书

本发明公开了一种稻米锰含量简易快速测定法，将待测水稻和标准品水稻分别进行如下的步骤1)～5)；1)、水稻糙米加入4％NaOH溶液、35％过氧化氢糊化；然后加入10％HCl溶液浸提；2)、在步骤1)所得的溶液中加入8M NaOH溶液，静置，再加无水乙醇；3)、在步骤2)所得的溶液中加入1M EDTA溶液；4)、在步骤3)所得的溶液中加入甲醛肟溶液，振荡摇匀后静置；5)、在步骤4)所得的溶液中加入氨‑盐酸羟胺溶液，振荡摇匀后静置；6)、将步骤5)所得待测水稻的糙米反应液和标准品水稻的糙米反应液进行颜色比较；待测水稻的颜色深，说明待测水稻糙米的含锰量高于标准品水稻。

技术领域

本发明涉及水稻糙米含锰量的简易快速测定技术和筛选方法，主要涉及领域为农学、育种、水稻。

背景技术

水稻是世界第二大粮食作物，也是我国的主要粮食作物，其营养成分直接关系到消费者的身体健康，但目前生产上推广的许多水稻品种中一些人体所必需的重要矿质元素含量明显不足。锰是人体必需的微量元素之一，对促进骨骼的正常生长发育和维持脑功能等有着重要作用，适量的锰有益于人体健康。借助食品添加剂或药物等可以补充人体锰元素，但存在投资大、费用高、覆盖面小等问题，不能在整体上解决锰营养不良的问题。通过常规育种、诱变育种等生物强化手段，可以有效提高水稻稻米中能为人体吸收利用的锰营养元素含量。但培育富含锰营养成分的水稻新品种(系)过程中，需要测定大量种质资源、育种群体或诱变群体等单株的稻米锰含量，数量极大。因此，锰营养成分的测定方法和技术是筛选水稻富锰单株、提高稻米锰含量的最重要限制因子，重点及难点在于如何简易、快速、经济和有效地鉴定稻米锰元素的含量。目前稻米中矿物质含量的测定方法一般都需要昂贵的仪器、以及繁琐的样品前处理程序；不但测定费用高，而且不能快速、高效地测定出稻米的锰含量，因而不适合于水稻育种过程中的大批量单株筛选。由于在水稻育种的单株选择过程中，一般不需要很精确地确定水稻单株的稻米锰含量水平，只需获得群体单株间或与对照植株间稻米锰含量的相对差异就可达到富锰单株筛选之目的。因此，提出稻米锰含量的简易快速测定技术，用于水稻育种群体中的富锰单株快速鉴定，可以快速筛选出符合要求的富锰单株。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种稻米锰含量简易快速测定法，该方法可为富锰水稻育种提供简易、快速、经济和有效的单株筛选方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种稻米锰含量简易快速测定法，将待测水稻和标准品水稻分别进行如下的步骤1)～5)；

1)、取水稻糙米4粒，加入4％NaOH溶液1.0mL、35％过氧化氢0.1mL，于65±5℃糊化3±0.1h；

然后加入10％HCl溶液1.0mL浸提，于50±5℃恒温水浴振荡器中下震荡20±2min，振荡频率为250±10r/min；

上述％均为质量％；

2)、在步骤1)所得的溶液中加入8M(8mol/L)NaOH溶液0.4mL，混匀后静置1h，再加0.5mL的无水乙醇，振荡摇匀；

3)、在步骤2)所得的溶液中加入1M(1mol/L)EDTA溶液0.1mL，振荡摇匀；

4)、在步骤3)所得的溶液中加入甲醛肟溶液0.1mL，振荡摇匀，静置20±2min；

5)、在步骤4)所得的溶液中加入氨-盐酸羟胺溶液0.5mL，振荡摇匀，静置20min；

6)、将步骤5)所得待测水稻的糙米反应液(即，静置后所得的上层清液)和标准品水稻的糙米反应液进行颜色比较；

当待测水稻糙米反应液的颜色比标准品水稻糙米反应液的颜色深时，说明待测水稻糙米的含锰量高于标准品水稻；

反之，当待测水稻糙米反应液的颜色比标准品水稻糙米反应液的颜色浅时，则说明待测水稻糙米的含锰量低于标准品水稻。