[发明专利]一种高效提取微生物群体感应信号分子的方法在审
| 申请号: | 201710572159.4 | 申请日: | 2017-07-13 |
| 公开(公告)号: | CN107328636A | 公开(公告)日: | 2017-11-07 |
| 发明(设计)人: | 张智明;俞卓栋;朱亮;徐向阳 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
| 主分类号: | G01N1/40 | 分类号: | G01N1/40 |
| 代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司33200 | 代理人: | 张法高,傅朝栋 |
| 地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 高效 提取 微生物 群体 感应 信号 分子 方法 | ||
1.一种高效提取微生物群体感应信号分子的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:收集SBR反应器运行周期中出水阶段的全部泥水混合物,经过沉淀后再通过装有0.45μm玻璃纤维滤膜的玻璃砂芯滤器过滤;
步骤2:取经过过滤的液体并置于梨形分液漏斗中,加入有机溶剂作为萃取剂,利用分液漏斗振荡器进行振荡,萃取重复若干次,收集有机相;
步骤3:通过旋转蒸发仪连续进料口将收集的有机相吸入蒸发瓶中至有机相蒸干,取萃取剂充分洗涤蒸发瓶若干次,洗涤液体收集至离心管中;
步骤4:将所述离心管置于氮吹仪上,氮吹过程中不断调节氮吹针高度,使离心管内液面处于震动状态,直至离心管内液体吹干;然后利用溶剂对氮吹后的固体进行定容,完成SBR反应器出水中群体感应信号分子的提取和富集。
2.如权利要求1所述的高效提取微生物群体感应信号分子的方法,其特征在于,所述的步骤1中泥水混合物预先经过1-2min沉淀后再装入玻璃砂芯滤器中进行过滤。
3.如权利要求1所述的高效提取微生物群体感应信号分子的方法,其特征在于,所述的步骤2中所述的有机溶剂包括二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
4.如权利要求1所述的高效提取微生物群体感应信号分子的方法,其特征在于,所述的步骤2中离心上清液与有机溶剂的混合体积比为1:(1-2)。
5.如权利要求1所述的高效提取微生物群体感应信号分子的方法,其特征在于,所述的步骤2每次萃取过程中,分液漏斗振荡器以200-300rpm振荡5-10min,萃取重复2-5次。
6.如权利要求1所述的高效提取微生物群体感应信号分子的方法,其特征在于,所述的步骤3中,旋转蒸发仪的减压蒸馏温度为30-40℃,压力为500-800mbar。
7.如权利要求1所述的高效提取微生物群体感应信号分子的方法,其特征在于,所述的步骤4的氮吹过程中,氮气流量控制在1.0-3.0L/min。
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