[发明专利]一种白簕叶片中总多酚分离纯化工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种白簕叶片中总多酚分离纯化工艺，属于含有来自植物的药物制剂技术领域。

背景技术

咖啡酰奎宁酸类，是一种广泛存在于植物中，具有抗氧化、抗炎、抗菌等药理活性，由一分子的奎宁酸和多个咖啡酸通过缩合反应形成的化合物。Zhang等对24种五加属植物进行了黄酮及咖啡酸奎宁等酚类物质进行了含量测定，证实了不同产地的白簕叶中均含有丰富的咖啡酰奎宁酸多酚类物质。Kiem等首次报道了从白簕茎皮中分离得到的苯丙素糖苷类成分，分别为1-β-D-吡喃葡萄糖基-2,6-二甲氧基-4-丙炔基—烯醇(1)和1-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基]-2,6-二甲氧基-4-丙烯基苯酚(2)；张元对白簕不同部位多酚含量及活性研究发现，白簕叶中多酚含量高且含量最好。综上研究结果表明，在白簕植株的各个部位中均有酚类物质存在，其中黄酮和酚酸类含量相当可观，可作为进一步开发利用基础。

通过前期研究表明：五加属植物白簕叶中咖啡酰奎宁酸类多酚类化学成分群含量丰富，通过HPLC-UV法对白簕叶中多酚类成分进行定性定量分析，发现其含量达到2％。而且研究发现，近些年对于白簕多酚类化合物的研究仅限于白簕总多酚的提取工艺研究；对不同品种的白簕总多酚含量研究；以及对白簕不同部位的多酚含量及抗氧化活性比较，且其他研究并未公布于众，这也为本课题的研究提供机会。我国作为白簕主要生产国之一，深度利用这一资源研究开发白簕叶中总多酚纯化工艺对后期开发相应医药及保健品奠定科学基础，具有良好的应用前景。

在对于传统药用植物中多酚类化合物的分离和纯化，据相关文献记述，主要方法有金属离子沉淀法、柱层析法、色谱法及生物膜技术等。其中利于大孔树脂对天然植物中活性化学成分的分离和纯化分析取得了极大的进展，也有工厂中放大生产的应用。在Wu等通过利用不同类型大孔吸附树脂对枸杞中类黄酮化合物进行吸附与解吸附的研究中可以得出，D101型树脂能够将溶质中黄酮类化合物的含量从0.58％提高到10.77％。Kim等也利用大孔吸附树脂对褐藻多酚进行吸附与解吸附纯化。这些实验虽然验证了大孔树脂在分离和纯化中的作用，然而含量均在15％以下，无法真正应用到实际操作中。

基于此，做出本申请。

发明内容

本申请以五加属药食同源植物白簕作为材料，同时利用超声提取-石油醚去脂溶性成分法获得白簕叶总多酚粗提取物，然后选出适合的填充材料，从而获得白簕叶总多酚的工业化、高纯的总多酚分离纯化工艺。

为实现上述目的，本申请采取的技术方案如下：

一种白簕叶片中总多酚分离纯化工艺，将白簕叶片总多酚粗提液作为上样液，将其上样在装有纯化大孔树脂的层析柱上，控制上样液的浓度为0.5-10mg/mL，pH为2-6，流速1-3mL/min；待上样完毕，以洗脱液进行解吸，解吸以体积浓度为10-90％的乙醇水溶液作为脱附液，脱附液pH2-7，速度为1-3mL/min，解吸所得解吸液浓缩真空冷冻干燥即得多酚样品。

进一步的，作为优选：

所述的白簕叶片总多酚粗取液的制备方法为：将白簕粉碎后加入萃取剂，以超声处理后，过滤得清液，浓缩，蒸馏水溶解后，加入石油醚，震荡混合，静置分层，将富集有多酚的水相蒸发浓缩、冷冻干燥获得粗提物，粗提物溶解配置形成不同浓度的粗提液。更优选的，所述的萃取剂为体积浓度为95％的乙醇，添加量为白簕体积的3倍；所述的过滤除去清液后的滤渣反复提取3-4次所得的回收清液与过滤所得清液合并浓缩；所述的蒸馏水温度为40-60℃，用于溶解，溶解过程中，为加快溶解效率，可配合超声进行促进；所述的石油醚的添加量为溶解液的3倍；所述的水相经过3-4次的萃取后，合并水相进行蒸发浓缩。