[发明专利]一种立体选择性的转氨酶在不对称合成手性胺中的应用

权利要求书

1.一种多肽在生产手性胺或以手性胺为前体的下游产物中的用途，其特征在于，所述多肽是：

(a1)具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽；或

(b1)将SEQ ID NO:1所示氨基酸序列经过一个或几个，优选1-20个、更优选1-15个、更优选1-10个、更优选1-3个、最优选1个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有(a1)所述多肽功能的由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽衍生的多肽。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(b1)所述多肽是在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的任一端经过一个或几个，优选1-20个、更优选1-15个、更优选1-10个、更优选1-3个、最优选1个氨基酸残基的添加而形成的，具有(a1)所述多肽功能的由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽衍生的多肽。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

4.如权利要求1-3中任一项所述的用途，其特征在于，所述手性胺包括以下化合物1a-7a或其药学上可接受的盐：

5.如权利要求1-3中任一项所述的用途，其特征在于，所述以手性胺为前体的下游产物包括：西他列汀(化合物5a)，手性酸拆分剂或是手性药物中间体的原料(化合物1a)，度鲁特韦中间体(化合物3a)，手性药物中间体原料(化合物2a、化合物4a)，西他列汀中间体(化合物6a、化合物7a)。

6.一种生产手性胺的方法，其特征在于：所述方法包括：

(a)在液态反应体系中，以前手性羰基化合物为底物，在辅基存在下，在立体选择性转氨酶催化下，进行反应式I所示的反应，从而形成手性胺；

(b)任选地从所述上一步骤的反应后的反应体系中分离出手性胺。

7.一种手性胺生产菌株，其特征在于，所述菌株表达以下多肽：

(a1)具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽；或

(b1)将SEQ ID NO:1所示氨基酸序列经过一个或几个，优选1-20个、更优选1-15个、更优选1-10个、更优选1-3个、最优选1个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有(A)所述多肽功能的由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽衍生的多肽。

8.一种生产手性胺的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

1)采用生产条件培养权利要求7所述的生产菌株，从而得到手性胺；

2)任选地，从1)的培养体系中分离获得手性胺。

9.一种手性胺生产菌株的构建方法，其特征在于，所述方法包括：

使得所述菌株包含表达以下多肽的表达载体或使得所述菌株的基因组中整合有表达以下多肽的基因，所述多肽是：

(a1)具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽；或

(b1)将SEQ ID NO:1所示氨基酸序列经过一个或几个，优选1-20个、更优选1-15个、更优选1-10个、更优选1-3个、最优选1个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，具有(a1)所述多肽功能的由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽衍生的多肽。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述基因的序列选自下组：

(i)SEQ ID NO:2所示的序列；

(ii)与(i)限定的序列互补的多核苷酸；或

(iii)与(i)限定的序列具有至少70％，优选至少75％、80％、85％、90％，更优选至少95％、96％、97％、98％、99％以上的序列一致性的任一多核苷酸或互补序列。