[发明专利]一种利用米糠粕联产米糠蛋白和4-乙烯基愈创木酚的方法

权利要求书

1.一种利用米糠粕联产米糠蛋白和4-乙烯基愈创木酚的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取米糠蛋白粗品

将米糠粕使用弱碱溶液按料液比1:5～15浸泡，并将其放入超声细胞破碎仪中超声得到料液，采用0.1M浓度的NaOH或HCl调料液的pH值，使其pH值始终维持在8.5～9.5；处理好的料液于40～45℃条件下进行碱提1～2h后，离心处理得到残渣和上清液，残渣水洗备用；将合并的上清液调至pH值为4.0～5.0后进行酸沉，酸沉后离心得到蛋白沉淀和废液，对蛋白沉淀干燥回收得到米糠蛋白粗品，同时对残渣和废液进行回收；

所述的米糠粕和弱碱溶液的料液比1:5～15为每1g米糠粕加入5～15mL的弱碱溶液；所述的弱碱溶液为pH为8.5～9.5的NaOH溶液；

(2)提取阿魏酸粗提液

将步骤(1)产生的残渣和废液按料液比1:5～10混合得到料液，向料液中添加NaOH，使料液中NaOH的浓度达到0.5～1.0％(w/v)，在温度为60～80℃的条件下，碱解2～4h；待碱解结束后将料液在8000～10000r/min转速下离心10～20min，离心后上清液pH值调至6.5～7.5后得到阿魏酸粗提液，备用；

(3)制备海藻酸钙微球

将保藏编号CCTCC NO:M 2016674的芽孢杆菌DLF-15161接种到液体培养基中，在转速为140～200rpm/min、温度为30～40℃的条件下培养至稳定期，得到菌液；将菌液于8000～10000r/min离心10～20min得到菌泥；将菌泥与海藻酸钠溶液混合得到混合液，混合液中菌泥的质量浓度为5～10g/100mL，并将混合液均匀滴加至浓度为2～5g/100mL的CaCl₂溶液中，于4℃环境下反应12～24h得到微球；

所述的海藻酸钠溶液的浓度为2～5g/100mL，CaCl₂溶液的浓度为2～5g/100mL；

(4)生物合成4-乙烯基愈创木酚

将步骤(2)得到的阿魏酸粗提液浓缩至0.5～2.0g/L，并与步骤(3)中得到的微球按体积比5～10：1进行混合，在转速为60～120rpm/min、温度为30～40℃的条件下反应12～72h，得到转化液；将萃取剂与转化液按体积比1:5充分混合，静置后分相得到含4-乙烯基愈创木酚的萃取相，将萃取相中的萃取剂真空蒸发，即得到4-乙烯基愈创木酚。

2.根据权利要求1所述的利用米糠粕联产米糠蛋白和4-乙烯基愈创木酚的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中的得到残渣、上清液，得到蛋白沉淀、废液的离心转速均为3000～5500r/min，离心时间均为15～25min。

3.根据权利要求1或2所述的利用米糠粕联产米糠蛋白和4-乙烯基愈创木酚的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中超声细胞破碎仪的超声功率为60～100W，超声时间为2～10min。

4.根据权利要求1或2所述的利用米糠粕联产米糠蛋白和4-乙烯基愈创木酚的方法，其特征在于，所述的步骤(3)中液体培养基成分为：葡萄糖5.0g/L，酵母膏2.0g/L，KH₂PO₄1.0g/L，Na₂HPO₄·12H₂O 4.0g/L，CaCl₂ 0.05g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2g/L，NaCl0.2g/L。

5.根据权利要求3所述的利用米糠粕联产米糠蛋白和4-乙烯基愈创木酚的方法，其特征在于，所述的步骤(3)中液体培养基成分为：葡萄糖5.0g/L，酵母膏2.0g/L，KH₂PO₄ 1.0g/L，Na₂HPO₄·12H₂O 4.0g/L，CaCl₂ 0.05g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2g/L，NaCl0.2g/L。