[发明专利]通过HPLC法分离测定维生素E及其制剂中杂质的方法

说明书

本发明公开了一种通过高效液相色谱法分离测定维生素E及其制剂中杂质的方法，采用以下方式：色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈、乙醇和水的混合溶液为流动相A，以乙腈、乙醇和甲醇的混合溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长：260～310nm；柱温：25～45℃；流动相流速：0.5～2.0mL/min；进样量：20～150μL；样品溶液配制：采用极性溶剂配制dl‑α‑生育酚醋酸酯峰鉴别对照品溶液，其浓度可以为0.5～3mg/mL；测定：将上述溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。利用本发明的方法可以准确的进行原料药维生素E及其制剂的有关物质的定量分析，从而保证了维生素E及其制剂的质量可控性。

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别是涉及药物分析检测领域。本发明旨在建立高效液相色谱法（HPLC法）分离测定维生素E及其相关制剂中杂质的方法。

背景技术

维生素E是一种脂溶性维生素，又称生育酚、抗不孕维生素等，具有抗氧化、繁殖、免疫、抗衰老等一系列重要的生理生化功能，是动物和人类必不可少的一种微量营养素。本品分为合成型或天然型维生素E，合成型为（±）-2,5,7,8-四甲基-2-（4,8,12-三甲基十三烷基）-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯或dl-α-生育酚醋酸酯，天然型为（+）-2,5,7,8-四甲基-2-（4,8,12-三甲基十三烷基）-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯或d-α-生育酚醋酸酯。结构式为：

分子式为C₃₁H₅₂O₃，分子量为472.75。

由于维生素E在合成过程中有可能引入残留原料及其它杂质，在储藏过程或含维生素E制剂的工艺过程中有可能会产生降解产物：已知杂质dl-α-生育酚醋酸酯杂质A和dl-α-生育酚醋酸酯杂质B。因此，对该两种相关物质的定量控制具有重要意义。其结构式如下：

对维生素E杂质的检测方法目前仅有气相色谱法和滴定法，尚未检索到维生素E杂质检测的高效液相色谱法，且气相色谱法实验条件苛刻、操作繁琐、重现性较差，滴定法检出杂质单一，不能有效全面控制维生素E及其制剂的质量。我们经过一系列试验研究及方法学验证实验，成功制定了一种采用高效液相色谱法测定维生素E或含有维生素E的制剂中杂质的方法，根据实验结果并结合维生素E（dl-α-生育酚醋酸酯）EP8.0标准中所述杂质的RRT，来确定上述两种杂质的相对保留时间。本法有效地对维生素E进行纯度分析，本试验采用普通的色谱柱（C₁₈色谱柱）快速准确地实现了维生素E或含有维生素E的制剂中杂质的测定，操作简捷、专属性好、灵敏度高、重现性好，能够较好地控制维生素E及其制剂的质量，对合成和制剂工艺过程的质量控制、保证人民用药安全具有重要的现实意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于研究设计一种操作简便、快速有效、专属性好、灵敏度高、重现性好的维生素E或含有维生素E的制剂中杂质检测方法。

为此，本发明提供了一种使用高效液相色谱法测定维生素E或含有维生素E的制剂中杂质的方法，采用以下方式进行：

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈、无水乙醇和水的混合溶液为流动相A，以乙腈、无水乙醇和甲醇的混合溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长：260～310nm；柱温：25～45℃；流动相流速：0.5～2.0mL/min；进样量：20～150μL；

样品溶液的配制：采用极性溶剂配制dl-α-生育酚醋酸酯峰鉴别对照品溶液，其浓度可以为0.5～3mg/mL，所述极性溶剂选自乙醇或甲醇；

测定：将上述溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析；