[发明专利]负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系与其构建方法

说明书

本发明公开了一种负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系及其构建方法。所述的构建方法包括：将胶原支架于包含一种以上融合有胶原特异性结合肽的生物活性因子溶液中浸渍后清洗，除去未结合在所述胶原支架上的生物活性因子；以及，将胶原支架置入高分子溶液中并反应；对胶原支架进行清洗后，再置入胶原溶液中浸渍，之后再进行清洗。本发明提供的负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系生物相容性良好，可实现生物活性因子的长期缓慢并可控的释放，释放量和释放速率稳定可控，可杜绝“突释”现象，同时其构建方法简单，可控性好，反应条件温和，在生物组织损伤修复、药物的缓控释等方面具有巨大的应用潜力。

技术领域

本发明属于生物材料领域，具体涉及一种负载一种或多种生物活性因子的胶原支架的缓释体系、其构建方法及应用。

背景技术

脊髓损伤的修复目前为止仍是全球性的医学难题，给个人、家庭和社会带来沉重的负担。越来越多的研究者已经证明，损伤部位神经营养因子的匮乏是阻碍损伤修复的重要因素之一。因此，对损伤部位神经营因子的补充就成为脊髓损伤治疗的突破口之一。

目前，发现的具有神经营养作用的因子主要有，脑源性神经营养因子（BDNF）、神经营养因子NT-3、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等，具有保护神经元，促进感觉和运动神经元轴突生长的功能。

然而，神经营养因子释放入培养液后，很短时间内就会失活，只有很少部分因子能发挥与细胞的相互作用，治疗效果大打折扣。因此，如何建立行之有效的缓释策略使蛋白因子在治疗期间在损伤部位都能形成有效治疗浓度十分必要。

传统的缓释策略大多采用微囊微球包裹蛋白因子再负载于支架材料上，依靠包裹材料的降解缓慢释放蛋白因子，而这种方法的一个重大缺陷是负载的粒子不稳定，容易从支架上滑脱。另外，也有研究者将蛋白因子与凝胶材料共混，构建蛋白因子缓释支架，在这种方法中，由于蛋白因子参与了凝胶支架的制备过程，可能会经历有机溶剂、冻干、灭菌等过程，容易造成活性的丧失。近年来，层层自组装的方法被引入到药物的缓释体系中，目前为止，其中大多数方法利用的都是氢键、范德华力、疏水作用、共价键、亲水作用等作用力相互结合，但是这些方式的结合力弱或稳定性差，使得由此形成的缓释体系也仍然存在药物释放速度和释放量难以稳定控制等缺陷，例如会出现“突释”，导致治疗效果差，甚至会带来副作用。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系、其构建方法及应用，以克服现有技术中的不足。

为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：

本发明实施例提供了一种负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系的构建方法，其包括：

（1）将胶原支架于包含一种以上融合有胶原特异性结合肽的生物活性因子的生物活性因子溶液中浸渍；

（2）清洗除去未结合在所述胶原支架上的生物活性因子；

（3）将经步骤（2）处理后的胶原支架置入至少含有能与胶原结合的可降解的高分子的溶液中并反应；

（4）对经步骤（3）处理后的胶原支架进行清洗；

（5）将经步骤（4）处理后的胶原支架于胶原溶液中浸渍；

（6）对经步骤（5）处理后的胶原支架进行清洗。

在一些较佳实施方案中，所述的构建方法还包括步骤（7）：重复步骤（1）～步骤（6）的操作一次或多次。

本发明实施例还提供了由所述方法构建的负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系。

本发明实施例还提供了一种负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系，其包括：

胶原支架，