[发明专利]基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体及其制备方法、应用

权利要求书

1.一种基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体，其特征在于，由包括侧链修饰DNA 的可降解高分子聚合物、功能性核酸和交联剂自组装所得；所述的功能性核酸为siRNA、mRNA、质粒、非编码RNA、反义寡核苷酸或Cas9-sgRNA中的一种。

2.根据权利要求1所述的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体，其特征在于，所述的侧链修饰DNA 的可降解高分子聚合物由侧链带有叠氮基团的可降解高分子与二苯基环辛炔修饰的DNA连接所得。

3.根据权利要求2所述的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体，其特征在于，可降解高分子聚合物为聚己内酯、聚磷酸酯、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物或聚肽中的一种。

4.根据权利要求1所述的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体，其特征在于，所述的侧链修饰DNA 的可降解高分子聚合物中DNA的碱基随机选取，但碱基个数大于8个；所述的交联剂由两条部分互补DNA链组成，其中，互补部分的碱基序列是随机的，但碱基个数大于12个，非互补部分的DNA能够与可降解高分子聚合物侧链的DNA 相互配对。

5.根据权利要求1所述的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体，其特征在于，当功能性核酸为siRNA时，siRNA既为功能性核酸，又是交联剂，其中，siRNA的反义链与正义链的一端分别多出一段能够与可降解高分子聚合物侧链的DNA 相互配对的核酸序列。

6.根据权利要求1所述的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体，其特征在于，当功能性核酸不是siRNA时，该功能性核酸一端多出一段能够与可降解高分子聚合物侧链的DNA相互配对的核酸序列。

7.一种根据权利要求1~6任一所述的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）以开环聚合的方式合成侧链带有叠氮基团的可降解高分子，然后该可降解高分子与二苯基环辛炔修饰的DNA反应，得到侧链修饰DNA 的可降解高分子聚合物；

（2）再将侧链修饰DNA 的可降解高分子聚合物溶解在水中，加入功能性核酸反应，使得功能性核酸与侧链修饰DNA 的可降解高分子聚合物完全相互配对，配对完成后，还加入交联剂与侧链修饰DNA 的可降解高分子聚合物完全相互配对，即制得DNA水凝胶水溶液。

8.根据权利要求7所述的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体的制备方法，其特征在于，所述的侧链修饰DNA 的可降解高分子聚合物中的DNA与交联剂的摩尔比为8：1~2：1时，所制得的DNA水凝胶的尺寸为70nm-1.3μm。

9.权利要求1~6任一所述的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体或权利要求7、8任一所述的制备方法制得的基于DNA水凝胶的功能性核酸保护性载体在制备基于基因疗法治疗疾病的核酸类药物的用途。