[发明专利]紫草素类化合物在制备促进TRAIL抗肿瘤活性药物中的应用

说明书

本发明公开了紫草素类化合物在制备促进TRAIL抗肿瘤活性药物中的应用。本发明提供了紫草素类化合物在制备增强A抗肿瘤活性的药物中的应用，所述A为TRAIL重组蛋白或TRAIL修饰物。实验证明，在SKN预处理后再加入低剂量的TRAIL共刺激，能显著增加TRAIL对A549、HeLa、PANC1及HCT116的杀伤作用，而且对正常细胞系HEK‑293无细胞毒作用。说明紫草素类化合物可用于增强TRAIL、TRAIL重组蛋白或TRAIL修饰物的抗肿瘤活性。

技术领域

本发明涉及抗肿瘤领域中紫草素类化合物在制备促进TRAIL抗肿瘤活性药物中的应用。

背景技术

紫草萘醌类化合物是紫草的一类主要生物活性成分，具有抗菌、抗炎、抗癌等多种作用，并且作为天然色素应用于医药、化妆品和印染工业。紫草中所含的萘醌类化合物母核多为5，8-二羟基萘醌，具有异己烯边链，R-型紫草萘醌(紫草素类)为异己烯边链5号位置的取代基空间构型为R构型。目前已从紫草中分离得到15种紫草素类化合物，紫草素类化合物结构母核如式1：

紫草素类化合物取代基团各有不同，如有甲氧基，乙酰氧基，异戊酰基等，如表1(詹志来，等.紫草化学成分与药理活性研究进展.中国中药杂志，2015年11月第40卷第21期)。

表1、紫草中分离得到的紫草素类化合物

其中，紫草素(shikonin，SKN，通用名是5,8-二羟基-2-[(1R)-1-羟基-4-甲基戊-3-烯基]萘-1,4-二酮，SKN)是紫色片状结晶或结晶性粉末。不溶于水，溶于乙醇、有机溶剂和植物油。易溶于碱水，遇酸又沉淀析出。用于急性黄疸型或无黄疸型肝炎、慢性肝炎、扁平疣等的治疗，有较好疗效。对肝硬变(腹水)、寻常疣也有效。

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor relatedapoptosis-inducing ligand，TRAIL)是1995年Wiley等从人心肌cDNA文库中克隆出的、与细胞凋亡配体1(Apo 1L)具有较高同源性的TNF超家族成员，故其亦被命名为Apo 2L(Apoptosis-2Ligand)。TRAIL基因定位于染色体3q26.1-26.2，为1769bp片段，包含5个外显子。其cDNA长1.05kb，编码的蛋白由281个氨基酸残基组成，相对分子量为32.5KDa、等电点为7.63的II型跨膜蛋白。TRAIL蛋白的N末端无信号肽，其109位氨基酸残基是一个N连接糖基化位点，可被金属蛋白酶切割，产生114-281氨基酸残基的胞外活性部位。TRAIL的第230位有一个不配对的半胱氨酸残基(Cys230)，这是一个重要的功能基团，能与二价锌离子螯合，从而使TRAIL形成典型的链夹心三聚体活性结构。当该位点被突变后，TRAIL无法形成三聚体，导致其与受体的结合能力降低200倍，诱导细胞凋亡的能力也随之降低。因此，Cys230对维持TRAIL的空间结构及正常的生物活性具有决定性作用。