[发明专利]一种基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器及其制备与应用

权利要求书

1.一种基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

S11：以ITO导电玻璃为工作电极，铂丝电极为对电极，以g-C₃N₄和氧化石墨烯的混合溶液为电解液，在两电极系统中，采用循环伏安法，电压范围为-1.4～0.4V，扫速为60～100mV/s，电沉积11～20圈，将沉积完的电极用去离子水清洗，制得g-C₃N₄修饰的工作电极；

S12：将所述步骤S11中得到的g-C₃N₄修饰的工作电极放于铈离子和钴离子的混合溶液中，放入高压反应釜中，在120～240℃下在反应釜中反应6～24小时，将反应完的电极用去离子水清洗，制得g-C₃N₄负载铈钴氢氧化物修饰的工作电极；

S13：以铂丝电极为对电极，与所述步骤S12中得到的g-C₃N₄负载铈钴氢氧化物所修饰的工作电极，组成两电极系统，在含有硼元素的电解液中，采用i-t法进行电置换反应，电压设定0.2～1.5V，时间为10～36000s，将反应完的电极用去离子水清洗，制得B@Ce_xCo_1-xO₃/g-C₃N₄修饰的工作电极；

S14：在所述步骤S13制得的B@Ce_xCo_1-xO₃/g-C₃N₄修饰的工作电极表面滴涂8～12μL浓度为10μg/mL的炔雌醇抗体溶液，在4℃条件下保存晾干；

S15：将所述步骤S14中得到的电极用PBS缓冲溶液清洗，继续在电极表面滴涂8～12μL浓度为100μg/mL的牛血清白蛋白溶液，4℃条件下保存晾干；

S16：将所述步骤S15中得到的电极用PBS缓冲溶液清洗，在4℃条件下保存晾干后，制得炔雌醇光电化学传感器。

2.根据权利要求1所述的一种基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤S11中，g-C₃N₄和氧化石墨烯的混合溶液的制备方法为：将5mg的g-C₃N₄和0.1～0.5mg的氧化石墨烯混合，然后加入10mL去离子水，搅拌10min后进行水浴超声处理，制得g-C₃N₄和氧化石墨烯的混合溶液。

3.根据权利要求2所述的一种基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤S12中，铈离子和钴离子的混合溶液的制备方法为：将0.5～5mmol的铈盐、0.5～5mmol的钴盐和25mmol硫脲混合，加入100mL去离子水，然后搅拌至全部溶解，制得铈离子和钴离子的混合溶液。

4.根据权利要求3所述的一种基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述铈盐为：硫酸铈、氯化铈、硝酸铈或乙酸铈。

5.根据权利要求4所述的一种基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述钴盐为：硫酸钴、氯化钴、硝酸钴或乙酸钴。

6.根据权利要求5所述的一种基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述PBS缓冲溶液的浓度为10mmol/L，PH值为7.4。

7.一种根据权利要求1～6任一项所述方法制备得到的基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器。

8.权利要求7所述的基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器的应用，其特征在于，用于检测炔雌醇的含量。

9.根据权利要求8所述的基于二维多元金属复合纳米材料的光电化学炔雌醇免疫传感器的应用，其特征在于，所述炔雌醇的检测方法包括如下步骤：

S21：标准溶液配制：配制一组包括空白标样在内的不同浓度的炔雌醇标准溶液；

S22：传感器修饰：将所述步骤S21中配制的不同浓度的炔雌醇标准溶液分别滴涂到所述的炔雌醇光电化学传感器的表面，4℃条件下保存；

S23：工作曲线绘制：将饱和甘汞电极作为参比电极，铂丝电极作为辅助电极，与所述步骤S22中修饰好的炔雌醇光电化学传感器组成三电极系统，连接到光电化学检测设备上；在电解槽中先后加入15mL、PH值为9.6的Tris-HCl缓冲溶液和5mL、10mmol/L的L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐AAP溶液；采用i-t测试手段，根据所得的光电流值与炔雌醇标准溶液浓度之间的关系，绘制工作曲线；

S24：炔雌醇的检测：用待测样品代替所述步骤S21中的炔雌醇标准溶液，按照所述步骤S22和S23中的方法进行检测，根据响应信号的强度值和工作曲线，得到待测样品中炔雌醇的含量。