[发明专利]青贮玉米中非结构性碳水化合物含量测定方法

权利要求书

1.一种青贮玉米中非结构性碳水化合物含量测定方法，其特征在于，包括：

取所检测的青贮玉米全株进行粉碎、杀青、烘干后，再次粉碎过40目筛，烘干，密闭保存，制备成待测样品；定量称取所述待测样品，加入氯化钠缓冲液悬浮，沸水浴10min使淀粉糊化，糊化后冷却至60℃以下，依次加入α-淀粉酶液、支链淀粉酶液和糖化酶液，分别用各酶的最适反应环境孵育水解，定容、过滤，取滤液测还原糖，根据还原糖计算得出所检测的青贮玉米的非结构性碳水化合物含量。

2.根据权利要求1所述的青贮玉米中非结构性碳水化合物含量测定方法，其特征在于，所述方法中，根据还原糖计算得出所检测的青贮玉米的非结构性碳水化合物含量的计算公式如下：

上式中：k：还原性单糖标准曲线斜率；

V₁：样品溶液总体积(ml)；

m：样品重量(g)；

V₂：显色用样体积(ml)；

0.9：与还原性单糖的转换系数；

OD值：吸光值；

精确度：在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％。

3.根据权利要求1或2所述的青贮玉米中非结构性碳水化合物含量测定方法，其特征在于，所述方法中，向所述青贮玉米淀粉中加入氯化钠缓冲液的加入量为100ml，该氯化钠缓冲液中NaCl的质量百分浓度为0.3％。

4.根据权利要求1所述的青贮玉米中非结构性碳水化合物含量测定方法，其特征在于，所述方法中，依次加入α-淀粉酶液、支链淀粉酶液和糖化酶液作为检测剂，用酶的最适温度孵育水解包括：

先向冷却后的青贮玉米样品糊化物中加入α-淀粉酶液，在85℃孵育40min,水解使青贮玉米淀粉糊化物液化；

然后，向青贮玉米淀粉糊化物液化液中加入支链淀粉酶液，在60℃孵育糖化酶30min，水解该液化液中的α-1,6糖苷键支链淀粉；

最后，向液化液后加入糖化酶液，在60℃孵育30min，水解液化液中的极限糊精及麦芽糖成葡萄糖。

5.根据权利要求1或4所述的青贮玉米中非结构性碳水化合物含量测定方法，其特征在于，所述方法的依次加入α-淀粉酶液、支链淀粉酶液和糖化酶液作为检测剂中，

所述α-淀粉酶液的加入量为10ml，质量百分浓度为1％；

所述支链淀粉酶液的加入量为10ml，质量百分浓度为1％；

所述糖化酶液的加入量为10ml，质量百分浓度为10％。

6.根据权利要求1或2所述的青贮玉米中非结构性碳水化合物含量测定方法，其特征在于，所述方法中，所检测的青贮玉米全株进行粉碎、杀青、烘干后，再次粉碎过40目筛，烘干，密闭保存，制备成待测样品。

7.根据权利要求1或2所述的青贮玉米中非结构性碳水化合物含量测定方法，其特征在于，所述方法中，定容,过滤。