[发明专利]基于铜锌锡硫合金量子点的多巴胺检测方法

说明书

本发明公开基于铜锌锡硫合金量子点的多巴胺检测方法，铜锌锡硫合金量子点采用铜盐、锌盐、亚锡盐的低毒金属盐类化合物，高分子聚合物作为包覆稳定剂，滴加硫脲在水热条件下合成出铜锌锡硫合金量子点，随包覆剂的比例增加，发射波长可逐渐从紫外光区移向蓝光区域和可见光区域。在进行多巴胺检测时，以铜锌锡硫合金量子点为荧光标记物，多巴胺与量子点作用，以使检测体系的荧光强度淬灭，即多巴胺浓度与荧光强度呈现线性淬灭关系，对比标准曲线，即可得到多巴胺浓度。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，更加具体地说涉及，一种在水热条件下制备铜锌锡硫(CZTS)合金量子点的方法以及基于铜锌锡硫合金量子点的多巴胺检测方法。

背景技术

从上世纪70年代开始，人们就将关注点落在了半导体纳米晶上，至今已应用于众多领域。量子点由于其纳米级的尺寸效应具有了许多特殊性质，例如独特的光学和电学性质。正是由于这些独特的光、电学性质，使得量子点成为一种方兴未艾的研究工具。起初人们希望可以利用量子点的特殊性质制成量子计算机，但一直没有很大突破。之后人们又将量子点应用于生物领域，但由于当时量子点制备困难，合成条件苛刻，且量子点荧光产率低，不易与生物分子结合，所以未见明显成效。随研究者们的不断尝试，量子点的合成方法不断优化，通过水相合成的量子点不仅可以应用于各种生物成像标记研究，在生命科学研究方面的前途更是不可限量。合金量子点可以通过调节各组分含量来改变其内部结构，达到改变其荧光发射波长的目的，即发射出不同颜色的荧光。根据以往的报道，合金量子点的荧光强度和效率与普通量子点相仿，甚至可以超过普通量子点。

多巴胺属于生物源儿茶酚胺中的一种，是中枢神经系统中主要的内源性神经递质。大脑中多巴胺的水平与动物的运动能力紧密相关，还参与眼内压和视网膜信息传递的调控。大脑中多巴胺的过量常常引起心情上的愉快和兴奋，而大脑中多巴胺的缺乏可能导致帕金森病和精神分裂症。迄今为止，已有许多可对多巴胺进行定量检测的方法，例如电化学，化学发光，高效液相色谱，毛细管电泳等。然而，上述方法均存在些许弊端，有的所需设备较为昂贵，有的操作过程复杂，有的涉及高毒药品的使用。因此，目前急迫地需要开发一种快速，简便，低成本，灵敏度高和选择性强的方法来检测生物液中痕量多巴胺。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供基于铜锌锡硫合金量子点的多巴胺检测方法，该方法低毒，水溶性好，量子效率高，生物相容性好，成本低廉，步骤简单，对操作人员和仪器设备要求低。

本发明的技术目的通过下述技术方案予以实现：

基于铜锌锡硫合金量子点的多巴胺检测方法，以H₃PO₄-HAc-H₃BO₃缓冲水溶液、铜锌锡硫合金量子点溶液和待测样品溶液组成多巴胺检测体系，使用荧光光度计检测其荧光强度，检测体系的荧光强度随检测体系中多巴胺浓度的增大而下降，即荧光强度呈现出线性猝灭关系；对比标准曲线，即得到检测体系中多巴胺的浓度，利用铜锌锡硫合金量子点定量检测多巴胺在在0.2-300微摩/升的范围内荧光呈线性淬灭，拟合方程式为y＝782.572-3.821x+0.007x²,R²＝0.985；y为检测体系的荧光强度，x为检测体系中多巴胺浓度，最低检出限为92nmol/L。

在上述检测方法中，在得到检测体系中多巴胺浓度之后，根据检测体系的组成即可换算出待测样品溶液中多巴胺的浓度。

在上述检测方法中，向离心管中依次加入50-400μL铜锌锡硫合金量子点溶液，铜锌锡硫合金量子点的浓度为1—5mmol/L；100-1000μL 0.04mol/L pH为12的H₃PO₄-HAc-H₃BO₃缓冲溶液混合均匀后，向其中加入40μL待测样品溶液，再加高纯水定容至4mL，充分混合，静置50—60分钟后用荧光分光光度计进行检测。