[发明专利]一种芝麻抗裂蒴性检测引物、检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明涉及一种芝麻抗裂蒴性检测引物、检测试剂盒及检测方法，属于分子生物学技术领域。抗裂蒴芝麻KANADI基因与裂蒴芝麻基因的序列相比，DNA序列缺失14个碱基，cDNA序列缺失了77个碱基，缺失碱基位于转录起始密码子下游第1,118bp与1,132bp之间，14bp碱基位于第2个外显子和第2个内含子连接处。本发明根据该基因序列差别特点设计抗裂蒴性检测引物，为芝麻分子标记辅助选择育种提供了重要检测引物，为筛选抗裂蒴的芝麻新品种提供了快速、准确的检测方法。

技术领域

本发明涉及一种芝麻抗裂蒴性检测引物、检测试剂盒及检测方法，属于分子生物学技术领域。

背景技术

芝麻(Sesamum indicum L.)属胡麻科胡麻属，是我国重要的优质油料作物和特色农产品，更是重要的出口创汇农产品。近年来，我国食用油供需矛盾十分突出，采取各种措施不断增加芝麻产量、提高芝麻生产效率是芝麻研究的重大课题。但芝麻种植手段落后，从播种到收获以人工操作为主，原始的种植方式导致芝麻生产投入的劳动力过多，劳动强度大，生产效率低。因此，降低芝麻生产成本，尽快推进芝麻生产机械化进程，是芝麻生产发展的必然趋势。

目前我国种植的芝麻品种都是裂蒴型的，而且是无限生长习性，开花时间长，蒴果成熟时间不一致，成熟时蒴果易开裂落粒，收获不及时产量损失可达50％；气候干燥时，芝麻落粒达60-70％；雨后产量损失更多。增强芝麻的抗裂蒴性既可以降低机械化收获造成的落粒损失，提高种子的收获效率，还有利于提高籽粒成熟度，保证芝麻的品质。河南省农业科学院从20世纪80年代从国外引进了闭蒴型芝麻种质，但这些材料由于产量低、杯状叶、脱粒困难等缺点，限制了其在生产中的直接应用。另一方面，芝麻裂蒴的遗传机制模糊不清，也限制了芝麻抗裂蒴性品种的选育。

芝麻蒴果的开裂是由其蒴果的结构、生理生化机制和分子遗传学基础决定。芝麻蒴果结构的研究发现，蒴果是沿着假隔膜处中果皮细胞分离形成的弱化带开裂(可能是由聚半乳糖醛酸酶和纤维素酶活性引起)。蒴果壁干燥过程中，由于中果皮的薄壁细胞与内果皮的厚壁细胞收缩程度不同，蒴果壁产生张力，迫使蒴果开裂。一旦蒴果开裂，胎座枯萎时附着在胎座上的种子自然脱落。芝麻落粒性依赖于蒴果的开裂程度，以及种子对蒴果的附着性，而抗裂蒴性芝麻品种蒴果连接处外果皮和中维管束之间有许多细胞层，这个特点可以减少抗裂蒴性芝麻品种裂蒴。遗传研究方面，Langham et al研究表明芝麻蒴果类型是一个简单的质量性状，由一个位点上的两个等位基因控制，裂蒴(Id)相对于抗裂蒴(id)是完全显性。Weiss et al的研究也发现F2群体裂蒴与抗裂蒴之比为3:1。但Yermanos et al在F2群体中却发现裂蒴与抗裂蒴之比为8:1。Nafie Ali的研究解释了这种现象，认为抗裂蒴性有两种遗传控制模式，有些基因型材料抗裂蒴性是由1对基因(idid)控制，有些基因型材料抗裂蒴性是由两对基因控制。由于抗裂蒴性芝麻在机械收获时具有商业价值，很多学者试图将抗裂蒴性导入到栽培种芝麻中。但是，在所有的杂交和选择过程中，没有获得抗裂蒴且无不良性状的材料，这表明蒴果类型或者Id位点具有一因多效性。抗裂蒴性分子标记研究方面，Uzun et al利用土耳其品种“Muganli-57”与闭蒴突变体CC3杂交构建的F2群体为材料，利用分离群体混合分组分析法(Bulk Segregant Analysis，BSA)首次找到了1个与芝麻闭蒴性连锁的AFLP标记。

但是，上述传统的分子标记检测芝麻的抗裂蒴性时具有检测繁琐，重复率低等诸多缺陷。因此，目前亟需找到一种能够简化检测流程、并且重复率高的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种芝麻抗裂蒴性检测引物，该引物检测方便，检测效率高，重复率好。

本发明还提供了包含上述检测引物的检测试剂盒。

本发明还提供了芝麻抗裂蒴性检测方法，该方法可以对芝麻抗裂蒴性进行早期世代选择从而缩短育种周期，能够较快地筛选出抗裂蒴的芝麻材料。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：