[发明专利]MDR1基因多态性检测体系及其试剂盒在审

专利信息
申请号: 201710540251.2 申请日: 2017-07-05
公开(公告)号: CN107267621A 公开(公告)日: 2017-10-20
发明(设计)人: 王明;赵会 申请(专利权)人: 上海赛安生物医药科技股份有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 上海海颂知识产权代理事务所(普通合伙)31258 代理人: 任益
地址: 200436 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: mdr1 基因 多态性 检测 体系 及其 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种MDR1基因多态性检测体系,其特征在于:包括检测引物对、检测探针和肽核酸,

所述检测引物对包括检测MDR1基因C3435T多态性位点外侧的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的外侧上游引物、检测MDR1基因C3435T多态性位点外侧的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的外侧下游引物、检测MDR1基因C3435T多态性位点内侧的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示的内侧上游引物、检测MDR1基因C3435T多态性位点内侧的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示的内侧下游引物;所述外侧上下游引物引入脱氧次黄嘌呤;

所述检测探针包括检测MDR1基因C3435T多态性位点为野生型的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示的野生型探针和检测MDR1基因C3435T多态性位点为纯合子的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示的纯合子探针;所述野生型探针和纯合子探针引入脱氧次黄嘌呤和错配碱基;所述肽核酸包括与检测MDR1基因C3435T多态性位点的内侧上游引物部分互补的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示的肽核酸和与检测MDR1基因C3435T多态性位点的内侧下游引物部分互补的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的肽核酸。

2.根据权利要求1所述的MDR1基因多态性检测体系,其特征在于:还包括内参引物对、内参探针、质控引物对和质控探针;

所述内参引物上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示,所述内参下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.10所示,所述内参探针的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示;

所述质控上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.12所示,所述质控下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.13所示,所述质控探针的核苷酸序列如SEQ ID No.14所示。

3.根据权利要求2所述的MDR1基因多态性检测体系,其特征在于:所述各个探针的5’端设有荧光报告基团,所述各个探针的3’端设有荧光淬灭基团;所述荧光报告基团是FAM、HEX、ROX或Cy5,所述荧光淬灭基团是BHQ1、BHQ2或TAMRA。

4.根据权利要求2所述的MDR1基因多态性检测体系,其特征在于:所述外侧上下游引物在反应体系中的最终浓度0.05μm/l,所述内侧上下游引物在反应体系中的最终浓度0.19μm/l,所述肽核酸在反应体系中的最终浓度为1nm/l,所述野生型探针在反应体系中的最终浓度为0.19μm/l,所述纯合子探针在反应体系中的最终浓度为0.19μm/l;

所述质控引物对在反应体系中的最终浓度为0.19μm/l,所述内参引物对在反应体系中的最终浓度为0.19μm/l,所述内参探针在反应体系中的最终浓度为0.19μm/l,所述质控探针在反应体系中的最终浓度为0.19μm/l。

5.根据权利要求1或2所述的MDR1基因多态性检测体系,其特征在于:还包括甲酰胺,反应体系中加入甲酰胺的体积是反应体系总体积的12%。

6.一种采用如权利要求1所述的检测体系的MDR1基因多态性检测产品。

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