[发明专利]甲砜霉素与氟苯尼考关键中间体的生物制备方法有效
| 申请号： | 201710533399.3 | 申请日： | 2017-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN109207531B | 公开（公告）日： | 2022-04-19 |
| 发明（设计）人： | 张福利;陈少欣;倪国伟;邹杰;汤佳伟;谭支敏;郭翔 | 申请（专利权）人： | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C07C315/04;C07C317/32 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 崔佳佳;陆凤 |
| 地址： | 201203 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 霉素 氟苯尼考 关键 中间体 生物 制备 方法 | ||
1.一种化合物Y的制备方法，其特征在于：包括步骤：
在液态反应体系中，以化合物X为底物，在辅酶存在下，在(R,S)-羰基还原酶催化下，进行式A所示的反应，从而形成化合物Y；
式A中，
其中，所述羰基还原酶来源于羰基还原酶EA，其氨基酸序列如SEQ ID NO.：1所示。
2.根据权利要求1中所述的制备方法，其特征在于，所述的辅酶选自下组：还原性辅酶、氧化性辅酶，或其组合。
3.根据权利要求1或2中所述的制备方法，其特征在于,所述的辅酶选自下组：NADH、NADPH、NAD、NADP、或其组合。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于,所述NADH、NADPH、NAD或NADP用量与底物用量的重量比率为0.01％～1.0％。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于,所述NADH、NADPH、NAD或NADP用量与底物用量的重量比率为0.01％～0.5％。
6.根据权利要求1或2中任一所述的制备方法，其特征在于，所述的反应体系中，还存在用于辅酶再生的酶。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的用于辅酶再生的酶选自下组：醇脱氢酶、甲酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、或其组合。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的反应体系中，还存在用于辅酶再生的共底物。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的共底物选自下组：异丙醇、葡萄糖、甲酸铵、或其组合。
10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的反应体系中，共底物的浓度为5-30％。
11.根据权利要求1或2中任一所述的制备方法，其特征在于，所述方法还包括：从所述上一步骤的反应后的反应体系中分离出化合物Y。
12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述反应后的反应体系中，化合物Y的ee值≥90％；de值≥90％。
13.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述反应后的反应体系中，化合物X被转化为化合物Y的转化率≥80％。
14.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述反应后的反应体系中，化合物Y的de值≥95％。
15.根据权利要求12-14中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述反应后的反应体系中，化合物Y的ee值≥99％。
16.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，化合物X被转化为化合物Y的转化率≥85％。
17.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，化合物X被转化为化合物Y的转化率≥95％。
18.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的羰基还原酶EA的编码基因序列如SEQ ID NO.：2所示的序列。
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