[发明专利]一种注射液中枸橼酸含量的测试方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种测试方法，尤其涉及一种注射液中枸橼酸含量的测试方法。

背景技术

枸橼酸是注射液中常用的辅料，临床上常用做pH调节剂，同时枸橼酸根离子可与血中钙离子生成难解离的可溶性络合物枸橼酸钙，此络合物易溶于水但不易解离，凝血过程受到抑制，从而阻止血液凝固。但当体内枸橼酸盐含量过高时，因枸橼酸盐不能及时被氧化，可致低钙血症，引起抽搐和心肌收缩抑制，在碳酸氢钠林格注射液的处方中既包含了氯化钙也有枸橼酸钠，同时用到枸橼酸作为pH调节剂，因此必须应严格控制枸橼酸的含量。

目前，《中国药典》2015版(通则0301)中枸橼酸盐的含量测试方法：(1)采用高锰酸钾滴定法，过程中需加热至沸腾，再进行滴定，滴定方法同时存在一定的人为误差不可避免。(2)取供试品加吡啶-醋酐(3：1)约5ml，振摇，即生成黄色到红色或紫红色的溶液。然而实验证明，当注射液中同时含有枸橼酸和枸橼酸盐时，此方法不适用；

《中国药典》2015版四部中枸橼酸离子的测试方法(1)比色法，使用的溶剂为三氯乙酸水溶液，采用紫外-分光光度法(通则0401)测试吸光度，计算枸橼酸离子的含量；(2)高效液相色谱法进行测试，所需溶剂为磺基水杨酸溶液，其过程复杂，运行时间长，对外界所需环境要求较高，人为因素不可避免。

发明内容

针对现有的枸橼酸测试存在的上述问题，现提供一种准确度高、精密度好、稳定性高注射液中枸橼酸含量的测试方法。

具体技术方案如下：

一种注射液中枸橼酸含量的测试方法，具有这样的特征，包括如下步骤：

步骤一、制备对照品储备溶液，再通过紫外分光光度计测试对照品溶液的吸光度，并绘制吸光度-枸橼酸含量标准曲线；

步骤二、制备待测品溶液，用紫外分光光度计测试待测品溶液的吸光度，并根据步骤一中绘制的吸光度-枸橼酸含量标准曲线计算待测品溶液中枸橼酸的含量。

上述的测试方法，还具有这样的特征，步骤一中对照品储备溶液的制备方法为：取经105℃干燥至恒重的枸橼酸50mg，加水溶解、定容后配制成浓度为500μg/ml的溶液，即得对照品储备溶液。

上述的测试方法，还具有这样的特征，吸光度-枸橼酸含量标准曲线的绘制方法为：

步骤一、分别向5只10ml容量瓶中加入对照品储备溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，加水稀释并定容、摇匀后，制得五个系列浓度的对照品溶液；

步骤二、分别于5只25ml具塞比色管中对应精密量取对照品溶液1.0ml，并均加入吡啶1.3ml，混匀，再均加入乙酸酐5.7ml，均用涡旋混合器混合15秒，立即均于31±1.0℃水浴中水浴32-34min，冷却至室温，测试各对照品溶液的吸光度，并以吸光度为横坐标，每毫升对照品溶液中枸橼酸的含量为纵坐标，绘制吸光度-枸橼酸含量标准曲线。

上述的测试方法，还具有这样的特征，待测品溶液的制备方法为：量取待测注射液10.0ml，并于25ml容量瓶中加水稀释、定容、摇匀，即得待测品溶液。

上述的测试方法，还具有这样的特征，待测品溶液的测试方法为：

步骤一、于25ml具塞比色管中精密量取待测品溶液1.0ml，加入吡啶1.3ml，混匀，再加入乙酸酐5.7ml，用涡旋混合器混合15秒，立即于31±1.0℃水浴中水浴32-34min，冷却至室温，即得测试液；

步骤二、于25ml具塞比色管中精密量取水1.0ml，加入吡啶1.3ml，旋摇混匀；再分别加入乙酸酐5.7ml，用涡旋混合器混合15秒，立即于31±1.0℃水浴中水浴32-34min，冷却至室温，即得空白参比溶液；

步骤三、以空白参比溶液做对照，用1.0cm比色管测试测试液的吸光度。

上述的测试方法，还具有这样的特征,吸光度的测试波长为425nm。

上述方案的有益效果是：

本发明提供的注射液中枸橼酸含量的测试方法中，以水作为测试溶剂，相对采用三氯乙酸水溶液作为测试溶剂而言，具有检测数据精确、稳定性较好、实验步骤简洁、测试耗时短、实验成本低的优点。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。