[发明专利]一种促进贺兰山丁香种子高效萌发的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种促进贺兰山丁香种子高效萌发的方法。

背景技术

贺兰山丁香(Syringa pinnatifolia var.alanshanica Ma et S.Q.Zhou)，是木犀科(Oleaceae)丁香属(Syringa)羽叶丁香(Syringa pinnatifolia)在贺兰山地区特有的一个变种，被列为国家三级重点保护珍稀濒危植物。贺兰山丁香是宝贵的蒙药材资源，蒙药名为阿拉善-阿嘎如，含有挥发油、萜类、香豆素、酚类、蛋白质和糖类等成分，具有镇赫依、清热、止痛、平喘等功效，临床上多与其他蒙药配伍治疗胸闷气短、心肌缺血等心肺疾病。

目前，贺兰山丁香野生资源濒危，而作为珍稀蒙药材，特别是在大健康时代背景下，贺兰山丁香的市场需求量日益增大。于是有限的资源和无限的市场需求的矛盾成为贺兰山丁香保护、开发和利用的桎梏。探索贺兰山丁香大规模繁殖策略是解决这一难题的有效途径。贺兰山丁香种子由于种皮致密坚硬，胚乳厚，种胚发育不全而且存在休眠现象等原因，发芽率仅有14％，且发芽不整齐，难以实现大面积人工种植。目前尚未见贺兰山丁香种子高效萌发方法的报道。

发明内容

为了解决贺兰山丁香种子休眠期长、发芽率低的技术问题，本发明提供了一种贺兰山丁香种子萌发的方法，包括如下步骤：

1)将贺兰山丁香种子在浓硫酸溶液中浸泡处理，得到浓硫酸处理后种子；

2)将所述浓硫酸处理后种子进行热激处理，得到热激处理后种子；

3)将所述热激处理后种子在添加GA₃的MS培养基中培养，实现种子萌发。

上述方法中，首先用浓硫酸浸泡贺兰山丁香种子，以改善种皮透性，便于种子吸涨。接下来利用热激处理和植物生长调节物质GA₃的协同作用，打破贺兰山丁香种子休眠，从而达到提高贺兰山丁香种子萌发率的目的。

上述方法中，步骤1)中，所述浓硫酸溶液(溶剂水)的质量百分含量为98％；

步骤2)中，所述热激处理为将所述浓硫酸处理后种子进行水浴加热处理；

步骤3)中，所述添加GA₃的MS培养基中的GA₃的浓度为0.1-2mg·L^-1；

或所述添加GA₃的MS培养基中的GA₃的浓度为0.5、0.1、1或2mg·L^-1。

添加GA₃的MS培养基为固体MS培养基中添加如下：

赤霉素(GA₃) 0.1～2mg·L^-1

蔗糖30g·L^-1

琼脂6～7g·L^-1

上述方法中，

步骤1)中，所述浸泡处理的时间为1-2.5min；或所述浸泡处理的时间为1、1.5、2或2.5min；

步骤2)中，所述加热处理的温度为30-50℃、时间为40-60min；或所述加热处理的温度为30、40或50℃、时间为40、50或60min；

步骤3)中，所述培养温度为20-25℃，所述培养的光周期为24h黑暗培养或8h光照且16h黑暗；

或所述培养温度为25±1℃，所述培养的光周期为24h黑暗培养；

或所述培养温度为22±1℃，所述培养的光周期为8h光照、16h黑暗；

或所述培养温度为25±1℃，所述培养的光周期为24h黑暗；

或所述培养温度为20±1℃，所述培养的光周期为8h光照、16h黑暗；

或所述培养温度为22±1℃，所述培养的光周期为24h黑暗。

上述方法中，

所述步骤1)和2)之间，还包括如下步骤：将所述浓硫酸处理后种子的pH值调至6.5-7。

上述方法中，

所述步骤1)和2)之间，还包括如下步骤：将所述热激处理后种子消毒。

上述方法中，

所述消毒的步骤如下：先将所述热激处理后种子用体积百分含量为75％的乙醇水溶液消毒，再用质量百分含量为0.1％的升贡水溶液消毒。

上述方法中，

所述贺兰山丁香种子为千粒重大于等于4.25g的种子。