[发明专利]一种植物内生真菌及其应用

权利要求书

1.一种植物内生真菌，其特征在于：分类学命名为烟管菌（Bjerkandera adusta）ZJUT-HS8，该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2017159，保藏日期为 2017年3月31日，保藏单位地址：中国，武汉，武汉大学。

2.一种权利要求1所述的植物内生真菌的应用，其特征在于，所述烟管菌（Bjerkanderaadusta）ZJUT-HS8在制备8α,15α-环氧化石杉碱甲中的应用。

3.权利要求2所述的植物内生真菌的应用，其特征在于，应用具体步骤如下：

1)挑取烟管菌（Bjerkandera adusta）ZJUT-HS8菌丝体接种于沙保氏琼脂培养基，28℃培养，使菌株活化；

2)将活化好的菌株接种于沙保氏液体培养基，投入底物石杉碱甲，28℃发酵培养，得转化产物；

3)发酵结束，过滤除去菌丝，调节发酵液pH至9-11，在发酵液中加入大孔吸附树脂，搅拌后放置过夜；然后过滤回收树脂，将树脂装入开放色谱柱，以甲醇洗脱，得甲醇洗脱液，减压蒸馏回收溶剂，得转化产物粗提物；

4)将转化产物粗提物用ODS C18填料进行柱层析，再经半制备HPLC分离，即得转化产物8α,15α-环氧化石杉碱甲。

4.根据权利要求3所述的植物内生真菌的应用，其特征在于，步骤(2)中的发酵条件为：转速为160-200转/分钟，培养时间6-14天，底物石杉碱甲的终浓度为0.01-0.1mg/ mL；步骤(3)中的发酵液pH调节剂为低浓度碳酸钠或氨水，所用大孔吸附树脂为弱极性或非 极性吸附树脂，树脂加入量为20-40克每升发酵液。