[发明专利]生物蛋白印迹水凝胶表面增强拉曼散射基底的制备方法

权利要求书

1.生物蛋白印迹水凝胶表面增强拉曼散射基底的制备方法，其特征在于，具体方法为：以Ag球为衬底，在Ag球衬底表面采用氨基硅烷试剂改性，在改性的Ag球上采用表面印迹方法均匀包覆印迹水凝胶薄膜，制得印迹水凝胶表面增强拉曼散射基底；

所述的Ag球是将AgNO₃水溶液加入超纯水中，再加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，室温下进行搅拌，取抗坏血酸溶液快速加入上述混合溶液中，颜色由无色迅速变为银灰色，待颜色不再加深，15min 后停止反应，即可形成Ag球，用水和乙醇交替洗除Ag球表面的聚乙烯吡咯烷酮溶液，通过离心获得Ag球纳米粒子，40℃下真空干燥 24h，该Ag球的尺寸为500nm~2μm，用表面印迹方法在Ag球上均匀包覆印迹水凝胶薄膜是在常温常压下，改性的Ag球分散在超纯水为溶液中；将蛋白质分散在磷酸缓冲溶液中，得到浓度为1mg/mL~4mg/mL的蛋白质溶液，所述的蛋白质溶液为牛血清蛋白或血红蛋白，再加入功能单体搅拌0.5-2小时，使功能单体与模板分子进行预聚合；再在制备的预聚合溶液中加入改性的Ag球超纯水溶液中，超声分散均匀，加入交联剂与引发剂进行聚合，聚合反应0.5-12h，在Ag球表面聚合印迹水凝胶薄膜，再通过洗液洗除蛋白质分子，得到产物经真空干燥12h后即为生物蛋白印迹水凝胶表面增强拉曼散射基底；

Ag球表面氨基改性，包括以下步骤：条件在常温常压下，Ag球置于水与乙醇以体积比为1/4的混合溶液中超声分散，滴入1mL的3-氨基丙基三乙氧基硅烷对Ag球表面进行改性。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，硝酸银水溶液的质量浓度为0.5~4mg/ml的硝酸银水溶液；抗坏血酸溶液的质量浓度为0.01~0.5g/ml；聚乙烯吡咯烷酮溶液的质量浓度为1 mol/L。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，1mg/mL~4mg/mL的蛋白质溶液与Ag球的质量比例为1/5-1。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的功能单体为N,N'-亚甲基双丙烯酰胺与丙烯酸以质量比为1：2-5的混合物，功能单体与蛋白质的摩尔比为1：5-10。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的交联剂为四甲基乙二胺，交联剂与蛋白质的摩尔比为1：25-40，所述的引发剂为偶氮二异丁腈，占所有原料的质量比为千分之一。