[发明专利]一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法有效
申请号: | 201710517029.0 | 申请日: | 2017-06-29 |
公开(公告)号: | CN107255714B | 公开(公告)日: | 2020-04-03 |
发明(设计)人: | 郑朝朝;张德宝;高晓磊;刘涛;郁宏伟;朱秀同;柳珊;杨保收 | 申请(专利权)人: | 瑞普(保定)生物药业有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 赵倩 |
地址: | 071001 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 肺炎 支原体 疫苗 效力 测定 方法 | ||
1.一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)免疫动物
筛选猪肺炎支原体抗原抗体阴性仔猪作为实验动物,用所述猪肺炎支原体疫苗对实验动物进行免疫;
(2)血清采集、稀释
免疫程序结束后,无菌采集动物血清,灭活,对血清做2~5倍系列稀释,得到不同稀释度的血清,作为待检样品;
(3)支原体-血清结合、培养
取待检样品与猪肺炎支原体检测用抗原等体积混合,每个样品设置复孔,同时设阴、阳性对照,将培养板密闭,使用A26液体培养基进行恒温培养,定期观察,所述猪肺炎支原体检测用抗原为猪肺炎支原体培养物用液体培养基稀释所得,其活菌滴度为1000CCU/ml,其中,阴性对照仅含液体培养基,但不添加猪肺炎支原体和待检血清,阳性对照孔仅含猪肺炎支原体检测用抗原,但不添加待检血清;
(4)结果判定
试验成立条件:阳性对照孔均变为黄色,阴性对照孔均不变色,
判定时间:当阳性对照孔全部变为黄色时进行结果判定,
判定标准:将不变色孔的待检样品最高稀释倍数判定为所述待检样品的效价,其中,不变色孔是指其中的培养物颜色与阳性对照孔的颜色不同的孔。
2.如权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(4)中所述判定时间为培养开始后第6天。
3.如权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤(4)中所述判定时间是阳性孔内培养物pH低于7.0时的时间。
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