[发明专利]与伪狂犬病病毒gB蛋白结合的单克隆抗体及其应用有效
申请号: | 201710514632.3 | 申请日: | 2017-06-29 |
公开(公告)号: | CN109206510B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 田克恭;郝丽影 | 申请(专利权)人: | 洛阳普泰生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K16/08 | 分类号: | C07K16/08;G01N33/577;G01N33/569 |
代理公司: | 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 | 代理人: | 吴大建;方莉 |
地址: | 471003 河南省洛阳市中国(河南)自*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 狂犬病 病毒 gb 蛋白 结合 单克隆抗体 及其 应用 | ||
1.特异性结合伪狂犬病病毒gB蛋白的可变区序列,其为鼠单克隆抗体3C12的可变区序列,所述鼠单克隆抗体3C12的可变区序列中,重链可变区氨基酸序列为序列SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,轻链可变区氨基酸序列为序列SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列;
和/或为鼠单克隆抗体5G12的可变区序列,所述鼠单克隆抗体5G12的可变区序列中,重链可变区氨基酸序列为序列SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列,轻链可变区氨基酸序列为序列SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列。
2.与伪狂犬病病毒gB蛋白结合的抗体,其包括权利要求1所述的鼠单克隆抗体3C12的重链可变区氨基酸序列和轻链可变区氨基酸序列。
3.根据权利要求2所述的抗体,其特征在于,所述抗体为单克隆抗体和/或基因工程抗体;所述基因工程抗体选自单链抗体、单链抗体片段、嵌合单克隆抗体、嵌合单克隆抗体片段、改形单克隆抗体、改形单克隆抗体片段、猪源单克隆抗体、猪源单克隆抗体片段中的一种。
4.根据权利要求2所述的抗体,其特征在于,所述抗体为鼠单克隆抗体3C12。
5.与伪狂犬病病毒gB蛋白结合的抗体,其包括权利要求1所述的鼠单克隆抗体5G12的重链可变区氨基酸序列和轻链可变区氨基酸序列。
6.根据权利要求5所述的抗体,其特征在于,所述抗体为单克隆抗体和/或基因工程抗体;所述基因工程抗体选自单链抗体、单链抗体片段、嵌合单克隆抗体、嵌合单克隆抗体片段、改形单克隆抗体、改形单克隆抗体片段、猪源单克隆抗体、猪源单克隆抗体片段中的一种。
7.根据权利要求5所述的抗体,其特征在于,所述抗体为鼠单克隆抗体5G12。
8.一种ELISA检测试剂盒,其包括权利要求2-4中任意一项和权利要求5-7中任意一项所述抗体、检测试剂和伪狂犬病病毒gB蛋白标准品。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述抗体包括鼠单克隆抗体3C12和鼠单克隆抗体5G12;其中,所述鼠单克隆抗体3C12和鼠单克隆抗体5G12中的一种包被在微孔板上,另一种被标记。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述标记的标记物包括酶、荧光基团或化学发光基团;和/或,所述检测试剂包括与所述标记物发生颜色反应的底物。
11.根据权利要求10所述的试剂盒,其特征在于,所述检测试剂包括酶显色试剂、荧光试剂或化学发光试剂。
12.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,包括包被鼠单克隆抗体3C12的微孔板、酶标的鼠单克隆抗体5G12、样品稀释液、洗涤液、显色液、终止液和伪狂犬病病毒gB蛋白标准品。
13.根据权利要求12所述的试剂盒,其特征在于,所述鼠单克隆抗体3C12的包被量为0.1-0.15μg/ml;所述酶标的鼠单克隆抗体5G12使用时进行1:(5000-7000)的体积稀释。
14.一种如权利要求8-13中任一项所述的ELISA检测试剂盒在制备定量检测伪狂犬病病毒gB蛋白表达量的检测试剂中的应用。
15.根据权利要求14所述的应用,其特征在于,所述的伪狂犬病病毒gB蛋白表达量为伪狂犬病病毒gB蛋白的单独表达量或伪狂犬病病毒gB蛋白与其它蛋白串联表达或融合表达时的伪狂犬病病毒gB蛋白的表达量。
16.一种如权利要求2-7中任意一项所述的抗体在进行非诊断目的的猪伪狂犬病病毒检测中的应用;
所述抗体使用时进行1:(50-1000)的体积稀释。
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