[发明专利]一种检测氟喹诺酮类药物的方法

权利要求书

1.一种基于磁性纳米材料-碳量子点荧光增敏检测氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于：具体步骤如下：

(1) 标准工作曲线的绘制：采用柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液配置8个浓度在0.01～20µg/L范围内的氟喹诺酮类药物标准溶液，加入水溶性硫掺杂荧光碳量子点溶液，用柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液定容至5mL，涡旋混匀静置后，在高效液相色谱条件下进样分析检测，以色谱峰面积对其相应浓度作图进行回归分析，即得到标准工作曲线，由此得到氟喹诺酮类药物的线性回归方程；

(2) 样品制备：取30-35mL牛奶于具塞离心管中水浴加热至40-45℃，搅拌下缓慢加入0.5-1.0mol/L HCl，调节pH至4.7-5.0，得到混悬液，待上述混悬液冷却至室温后，于5000r/min转速下离心10 min，取上清液，避光保存于4 ℃冰箱待分析测定；

(3) 样品测定：在步骤(2)制备的上清液加入磁性纳米材料，涡旋使其充分混匀后，通过外加磁铁进行磁分离，弃去磁性纳米材料，取出上清液1-2mL，加入水溶性硫掺杂荧光碳量子点溶液，用柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液调pH并定容至5mL，涡旋混匀静置后，经0.45µm水相滤膜过滤后，在高效液相色谱条件下进样分析检测，代入步骤(1)线性回归方程，计算出样品中氟喹诺酮类药物的含量；

所述水溶性硫掺杂荧光碳量子点的制备方法为称取3.0-5.0g聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-马来酸)钠盐，加入到100 mL超纯水中，超声5-10min，使其充分混匀形成无色透明液体，并转移至聚四氟乙烯反应釜，于220-250℃加热5-8h，自然冷却至室温后，先用孔径为0.22μm滤膜过滤，后用截留分子量为3000-3500Da的透析袋进行透析处理24 h，得到水溶性硫掺杂荧光碳量子点，并避光保存于4℃下，备用。

2.根据权利要求1所述的基于磁性纳米材料-碳量子点荧光增敏检测氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于：磁性纳米材料的制备方法为称取2.05-2.50g硫酸亚铁铵和1.41-2.00g三氯化铁，用50 mL去离子水溶解后，氮气保护下，水浴加热至75-85℃后，加入5-7mL体积百分比浓度28%的氨水，继续搅拌反应30 min，冷却至室温，用去离子水洗涤3次，在外加磁铁作用下分离，即得磁性Fe₃O₄。

3.根据权利要求1所述的基于磁性纳米材料-碳量子点荧光增敏检测氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于：氟喹诺酮类药物为左氧氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星、加替沙星中一种或几种。

4.根据权利要求1所述的基于磁性纳米材料-碳量子点荧光增敏检测氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于：柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液pH为6.0-7.0。

5.根据权利要求1所述的基于磁性纳米材料-碳量子点荧光增敏检测氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于：磁性纳米材料用量为5-25 mg。

6.根据权利要求1所述的基于磁性纳米材料-碳量子点荧光增敏检测氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于：水溶性硫掺杂荧光碳量子点用量为300μL。

7.根据权利要求1所述的基于磁性纳米材料-碳量子点荧光增敏检测氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于：涡旋混匀静置是指涡旋混匀0.5-3 min，然后静置5-10min。

8.根据权利要求1所述的基于磁性纳米材料-碳量子点荧光增敏检测氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于，高效液相色谱条件为：固定相C₁₈色谱柱，流动相梯度洗脱，0 min：乙腈-0.5%磷酸溶液，其中乙腈-0.5%磷酸溶液是乙腈和质量浓度0.5%的磷酸溶液按体积比15:85混合制得；12 min：乙腈-0.5%磷酸溶液，其中乙腈-0.5%磷酸溶液是乙腈和质量浓度0.5%的磷酸溶液按体积比35:65混合制得；流速1.0 mL/min；进样量为20 µL；柱温：30 ℃；荧光检测器：激发波长290 nm，发射波长490 nm。