[发明专利]重金属离子吸附系统及其宿主菌、重金属离子回收方法在审
申请号: | 201710501466.3 | 申请日: | 2017-06-27 |
公开(公告)号: | CN107326036A | 公开(公告)日: | 2017-11-07 |
发明(设计)人: | 赵劲;魏炜;孙培卿;崔汉立;刘祥志 | 申请(专利权)人: | 深圳劲宇生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C07K19/00;C12N1/21;C12N15/70;C02F3/34;C22B3/18;C22B11/00;C12R1/19;C02F101/20 |
代理公司: | 深圳中一专利商标事务所44237 | 代理人: | 官建红 |
地址: | 518000 广东省深圳市坪山新区坪*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重金属 离子 吸附 系统 及其 宿主 回收 方法 | ||
1.一种重金属离子吸附系统,其特征在于,包括相互连接的枯草芽孢杆菌芽孢衣蛋白CotC DNA序列和重金属离子结合蛋白DNA序列,且所述枯草芽孢杆菌芽孢衣蛋白CotC DNA序列与启动子连接。
2.如权利要求1所述的重金属离子吸附系统,其特征在于,所述启动子为Pcot或Pveg,所述Pcot的序列如SEQ ID NO:18所示,所述Pveg的序列如SEQ ID NO:21所示;且
所述枯草芽孢杆菌芽孢衣蛋白CotC DNA序列如SEQ ID NO:3所示。
3.如权利要求1所述的重金属离子吸附系统,其特征在于,所述重金属离子结合蛋白DNA序列为铅离子结合蛋白PbrR DNA序列,如SEQ ID NO:6所示;或
所述重金属离子结合蛋白DNA序列为金离子结合蛋白GolB DNA序列,如SEQ ID NO:9所示;或
所述重金属离子结合蛋白DNA序列为铀酰离子结合蛋白SUP DNA序列,如SEQ ID NO:12所示。
4.如权利要求1所述的重金属离子吸附系统,其特征在于,所述重金属离子结合蛋白DNA序列的下游连接有绿色荧光蛋白EGFP DNA序列,如SEQ ID NO:15所示。
5.一种重金属离子吸附蛋白表面展示系统,其特征在于,包括由权利要求1-3任一所述的重金属离子吸附系统表达的枯草芽孢杆菌芽孢衣蛋白CotC和重金属离子结合蛋白。
6.一种表达载体,其特征在于,包括如权利要求1-3任一所述的重金属离子吸附系统。
7.一种宿主菌,其特征在于,所述宿主菌包括如权利要求6所述的表达载体;或
所述宿主菌表达如权利要求5所述的重金属离子吸附蛋白表面展示系统。
8.一种重金属离子吸附系统的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
从枯草芽孢杆菌基因组中扩增出枯草芽孢杆菌芽孢衣蛋白CotC DNA序列;
从表达重金属离子结合蛋白的菌种基因组中扩增出所述重金属离子结合蛋白DNA序列;
将启动子、所述枯草芽孢杆菌芽孢衣蛋白CotC DNA序列和所述重金属离子结合蛋白DNA序列依次连接。
9.如权利要求8所述的重金属离子吸附系统的制备方法,其特征在于,扩增所述枯草芽孢杆菌芽孢衣蛋白CotC DNA序列的引物如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示;和/或
所述启动子为Pcot或Pveg;且扩增所述Pcot的引物如SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17所示,扩增所述Pveg的引物如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20所示;和/或
所述重金属离子结合蛋白DNA序列为铅离子结合蛋白PbrR DNA序列或金离子结合蛋白GolB DNA序列或铀酰离子结合蛋白SUP DNA序列;且扩增所述铅离子结合蛋白PbrR DNA序列的引物如DNA SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5所示;扩增所述金离子结合蛋白GolB DNA序列的引物如DNA SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8所示;扩增所述铀酰离子结合蛋白SUP DNA序列的引物拉如SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11所示。
10.一种重金属离子回收方法,其特征在于,包括如下步骤:
提供含有重金属离子的液体;
将权利要求7所述的宿主菌培养后加入所述液体中,静置处理;
待所述溶液中出现沉淀后,进行过滤处理得到吸附有重金属离子的所述宿主菌;
用酸处理吸附有重金属离子的所述宿主菌,分离后得到重金属离子。
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