[发明专利]利用CRISPR-CAS9技术敲除NRK细胞Slc22a2基因的方法有效
| 申请号： | 201710496608.1 | 申请日： | 2017-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN107177631B | 公开（公告）日： | 2020-11-24 |
| 发明（设计）人： | 许文涛;罗云波;祁潇哲;黄昆仑;朱丽叶;贺晓云 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/113 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;黄爽 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 crispr cas9 技术 nrk 细胞 slc22a2 基因 方法 | ||
【权利要求书】：
1.Slc22a2基因敲除的NRK细胞系作为细胞模型在研究OCT2蛋白对OTA转运功能中的应用，其中，Slc22a2基因敲除的NRK细胞系的构建方法包括：根据大鼠Slc22a2基因序列，构建基于CRISPER-Cas9系统的gRNA表达载体，以此作为Slc22a2基因打靶载体，转入NRK细胞中，获得Slc22a2基因敲除的NRK细胞；
其中，gRNA作用位点位于大鼠Slc22a2基因的2号外显子上，gRNA作用位点的DNA序列为5′-TTTCAGTCAGTAGTGAACGT-3′；
所述表达载体的出发载体为pX458。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述NRK细胞为NRK-52E。
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