[发明专利]一种非小细胞肺癌的生物标记物组合、该生物标记物组合的筛选及其应用

说明书

本发明涉及分子医学诊断领域，具体涉及一种非小细胞肺癌的生物标记物组合、该生物标记物组合的筛选及其应用。所述标记物包括肺腺癌生物标记物和/或鳞状细胞癌生物标记物；所述肺腺癌生物标记物包括hsa‑miR‑26a‑5p、hsa‑miR‑126‑5p、hsa‑miR‑139‑5p、hsa‑miR‑152‑3p、hsa‑miR‑451a、hsa‑miR‑200c‑3p、hsa‑miR‑3135b中的至少一种；所述鳞状细胞癌生物标记物包括hsa‑miR‑26a‑5p、hsa‑miR‑126‑5p、hsa‑miR‑139‑5p、hsa‑miR‑151a‑3p、hsa‑miR‑151a‑5p、hsa‑miR‑151b、hsa‑miR‑152‑3p、hsa‑miR‑550a‑3p、hsa‑miR‑3135b中的至少一种。本发明还提供了上述标记物的筛选方法及其在早期非小细胞肺癌诊断中的应用。本发明实现对非小细胞肺癌进行早期诊断和预测，更快捷、准确，提前了非小细胞肺癌的发现时机，有助于及时尽早的进行治疗，增加存活率。

技术领域

本发明涉及分子医学诊断领域，具体涉及一种非小细胞肺癌的生物标记物组合、该生物标记物组合的筛选及其应用。

背景技术

据世界卫生组织报告，全世界每年有近2000万新发恶性肿瘤患者，约有1100万死于恶性肿瘤。在我国，恶性肿瘤发病与死亡情况更为严峻，《2013年中国肿瘤登记年报》显示，我国每年新发癌症病例约350万，平均每分钟就有6人被诊断为癌症；癌症死亡率为13％，即每7至8人中有1人死亡，年死亡人数达270万例。在众多的恶性肿瘤中，肺癌已成为人体健康头号杀手。在肿瘤治疗方面，各种治疗技术不断更新，新的治疗方法层出不穷，如生物免疫治疗、介入治疗、核医学治疗和分子靶向治疗等。特别是随着在基因水平上对肿瘤发生与发展认识的日益深化，肿瘤医学正在进入一个个性化精确治疗的崭新时代。临床数据显示，如果能在肿瘤发病早期进行有效的治疗和干预，5年生存率至少提高2-3倍。然而，令人触目惊心的是，由于缺乏有效的早期诊断技术，近80％的癌症患者在发现时已经是中晚期，错失最佳治疗时间，所以肿瘤死亡率普遍较高。如何早期发现癌症，已经成为医学界的关注重点。

人类基因组通过转录和翻译可表达2万多种蛋白，但参与蛋白质编码的RNA仅占基因组转录产物的2％，其它98％的RNA是不具有编码蛋白功能的非编码RNA(non-codingRNA,ncRNA)。microRNA(miRNA)是近年来研究报道最多的大小约为22个核苷酸的非编码微小RNA。miRNA通过与靶mRNA 3’非翻译区(3’-UTR)结合，使靶mRNA降解或翻译受阻，在转录后水平负调控基因的表达，预计有近一半的人类基因受其调控；功能上涉及一系列生命活动，包括细胞增殖、分化、凋亡、胚胎发育和器官形成等。大量的研究工作已表明，体内miRNA异常与肿瘤的发生和发展密切相关，尤为令人鼓舞的是在血清/血浆中发现了能稳定存在且与人类重大疾病相关的循环miRNA，从而为包括肿瘤在内的各种疾病早期诊断和预后评估开辟了新途径。在肺癌研究方面，Chen等采用RNA测序方法比较健康人血清和NSCLC患者血清中的小分子RNA。结果显示，与正常人血清中的miRNA相比，肺癌患者的血清中有28种miRNA显著下调，63种miRNA显著上调(Chen X，Cell research 2008,18(10):997-1006)。Hu等通过比较60个具有不同生存期的NSCLC病人血清miRNA表达，并在243个病人中进行验证，发现有4种miRNA(miR-486、-1、-30d和-499)与NSCLC病人的生存率关系密切(Hu Z，Journalof clinical oncology，2010,28(10):1721-1726)。Bianchi等针对无症状高危人群，检测血清中34种miRNA的表达谱诊断早期NSCLC的正确率可达80％，灵敏度、特异性分别为71％和90％；Roth等报道，和肺部良性病变相比，肺癌患者血清miR-10b、-141和-155的表达明显增高(Bianchi F,EMBO Mol Med 2011,3(8):495-503)。因此，将循环miRNA的检测应用在肿瘤，尤其是肺癌的早期诊断、预后评估等有着非常重要的科学价值和社会效益。

发明内容