[发明专利]定量检测血清中可代谢产生H2O2的生物分子的方法

权利要求书

1.借助比率荧光探针定量检测血清中可代谢产生H₂O₂的生物分子的方法，步骤如下：

（1）、制备铜氮共掺杂碳点Cu-CDs；

（2）、将可代谢产生H₂O₂的生物分子与对应的氧化酶反应生成H₂O₂，用辣根过氧化酶催化H₂O₂，与底物邻苯二胺反应生成有黄色荧光的氧化产物DAP;

（3）、在步骤（2）的反应体系中加入Cu-CDs，DAP的荧光随待测物浓度增大而增强，而Cu-CDs则反之，DAP与Cu-CDs形成比率荧光，两者荧光强度的比值I₅₇₂/I₄₆₀与待测物浓度呈线性关系，根据两者荧光强度的比值，定量测定血清中生物分子。

2.根据权利要求1所述的借助比率荧光探针定量检测血清中可代谢产生H₂O₂的生物分子的方法，其特征在于，可代谢产生H₂O₂的生物分子是胆固醇、黄嘌呤、葡萄糖、乳酸、胆碱、丙酮酸或者谷氨酸。

3.根据权利要求1所述的借助比率荧光探针定量检测血清中可代谢产生H₂O₂的生物分子的方法，其特征在于：步骤（1）中，Cu-CDs是以一水合柠檬酸、二乙烯三胺、乙酸铜一水合物为原料,三者的摩尔比为6:2:1，以去离子水为溶剂，在200-250℃反应12-20 h后获得。

4.根据权利要求1所述的借助比率荧光探针定量检测血清中可代谢产生H₂O₂的生物分子的方法，其特征在于：步骤（2）中，生物分子与相应氧化酶混合后，按照混合后总体积1.0mL加入10 μL浓度为1-5 mg/mL氧化酶的比例加入辣根过氧化酶。

5.根据权利要求1所述的借助比率荧光探针定量检测血清中可代谢产生H₂O₂的生物分子的方法，其特征在于：步骤（2）中反应体系是在25-37 ℃反应20-45 min。

6.根据权利要求1所述的借助比率荧光探针定量检测血清中可代谢产生H₂O₂的生物分子的方法，其特征在于：步骤（3）中，Cu-CDs以磷酸盐缓冲液溶液的形式加入，加入量为20 μL，浓度为20-200 μg/mL，加入Cu-CDs后在25-37℃反应1 min。