[发明专利]一种防治番茄青枯病的微生物菌剂及其制备方法在审
申请号: | 201710487693.5 | 申请日: | 2017-06-23 |
公开(公告)号: | CN107296061A | 公开(公告)日: | 2017-10-27 |
发明(设计)人: | 余小兰;张俏燕;曹恩辉;李光义;李勤奋;王进闯;邹雨坤;麦力文 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 |
主分类号: | A01N63/00 | 分类号: | A01N63/00;A01N63/02;A01P1/00;C12N1/20;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/12 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司11246 | 代理人: | 夏艳 |
地址: | 571737 海*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 防治 番茄 青枯病 微生物 及其 制备 方法 | ||
1.一种防治番茄青枯病的微生物菌剂,其特征在于,按照体积比由以下组分构成:枯草芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、侧孢芽孢杆菌菌悬液1份和多粘芽孢杆菌菌悬液1份。
2.根据权利要求1所述的防治番茄青枯病的微生物菌剂,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液的浓度均大于1×108cfu/ml。
3.根据权利要求1所述的防治番茄青枯病的微生物菌剂,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液通过以下方法制备得到:在无菌条件下,将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌分别接种至TSA培养基上,28-30℃下培养48h;之后分别挑取各菌单菌落接种至TSA液体培养基中,28-30℃,200-220r/min下振荡培养24h,即得枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌悬液;镜检,确保各菌菌悬液浓度大于1×108cfu/ml。
4.根据权利要求3所述的防治番茄青枯病的微生物菌剂,其特征在于,TSA培养基为:酪蛋白胰酶消化物15.0g,大豆粉木瓜蛋白酶消化物5.0g,氯化钠5.0g,琼脂15.0g,pH值7.3;灭菌条件为:压强0.1-0.15MPa,温度121℃,时间30min。
5.一种防治番茄青枯病的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、制备枯草芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液:在无菌条件下,将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌分别接种至TSA培养基上培养;之后分别挑取各菌单菌落接种至TSA液体培养基中振荡培养,即得枯草芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液;
步骤2、称量:按照体积比称量以下组分:枯草芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、侧孢芽孢杆菌菌悬液1份和多粘芽孢杆菌菌悬液1份;
步骤3、混合:将称量好的枯草芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液混合均匀,制备得到防治番茄青枯病的微生物菌剂。
6.根据权利要求5所述的防治番茄青枯病的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤1中的所述枯草芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液的浓度均大于1×108cfu/ml。
7.根据权利要求5所述的防治番茄青枯病的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤1中的枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌在TSA培养基上的培养条件是:温度28-30℃,时间48h。
8.根据权利要求5所述的防治番茄青枯病的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤1中的枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌单菌落在TSA液体培养基上的培养条件是:温度28-30℃,转速200-220r/min,时间24h。
9.根据权利要求5所述的防治番茄青枯病的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤1中的TSA培养基为:酪蛋白胰酶消化物15.0g,大豆粉木瓜蛋白酶消化物5.0g,氯化钠5.0g,琼脂15.0g,pH值7.3。
10.根据权利要求9所述的防治番茄青枯病的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤1中的TSA培养基灭菌条件为:压强0.1-0.15MPa,温度121℃,时间30min。
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