[发明专利]用于基因分型检测α0缺失型地中海贫血的引物组及试剂盒

说明书

本发明提供了一种用于基因分型检测α⁰缺失型地中海贫血的引物组及试剂盒。所述引物组包括如下引物对：上下游引物序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的APF/APR；上下游引物序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示的SEAF/SEAR；上下游引物序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的THAIF/THAIR。本发明所述的引物组和试剂盒在检测α⁰‑地贫(‑‑^THAI与‑‑^SEA)方面具有快速、灵敏、安全等优点，可广泛应用于α⁰‑地贫(‑‑^THAI与‑‑^SEA)的检测。

技术领域

本发明属于分子生物学医药领域，涉及一种检测α⁰缺失型地中海贫血技术，特别是涉及一种单管直接PCR(Direct PCR)技术同时检测东南亚缺失型与泰国型α地中海贫血的试剂盒。

背景技术

α-地中海贫血(简称α-地贫)是世界上最常见的血液系统遗传病之一，该疾病是由于α-珠蛋白的基因缺失或功能障碍，导致a珠蛋白肤链合成减少或不合成引起。该病高发于从地中海沿岸的意大利、希腊、马耳他、塞浦路斯到东南亚各国的广大地区。我国南方也是本病的高发地区，在广西、广东，α-地贫基因的人群携带率分别高达17.55％，8.53％。由于α-地贫具有普遍性、人口基数大、涉及范围广等特点，包括我国南方在内的重症地中海贫血患儿的出生是世界公认的公共健康卫生问题。

正常情况下，人类珠蛋白基因所表达的α和β珠蛋白链之间保持适当比例(1:1)，形成具有功能的血红蛋白四聚体，极少或没有剩余的α-链或β-链。当珠蛋白基因在体内发生缺失、突变等基因缺陷时，致使血红蛋白四聚体中的珠蛋白肽链一种或几种合成缺乏或减少，而引起体内血红蛋白α-链与β-链比例失衡，进而导致血红蛋白不稳定，冗余的珠蛋白链沉积在红细胞膜上，红细胞膜的通透性和脆性发生改变，导致溶血性贫血，临床上表现出症状轻重不一的慢性进行性溶血性贫血。临床上，将α链合成减少而β链相对过剩则归类为α-地贫。

根据分子缺陷可将其分为:几个核苷酸的插入与缺失或单个碱基替换的非缺失型α-地贫和大片段基因的缺失型α-地贫两大类。而就一个单倍体而言，根据α-珠蛋白合成减少的程度，α-地贫可为两类缺陷:α⁰地中海贫血(α-地贫1)，特点为α-珠蛋白肤链合成完全受阻，缺失两个α基因(--/αα)；α⁰地贫基因具有明显的地理分布与种族特征，我国最常见的为--^SEA，少见--^THAI，而--^FIL则更罕见；②α⁺地中海贫血(α地贫2)，表现为α-珠蛋白肤链合成部分受阻，通常缺失一个α基因或一个α基因发生点突变或少数几个碱基的缺失或插入引起(--/-α，α^Tα/αα)，我国最常见的α⁺地贫基因为-α^3.7、-α^4.2缺失型突变以及Hb WS,Hb QS与HbCS等点突变。