[发明专利]一种杏梅组织培养快速繁殖方法有效
申请号: | 201710482433.9 | 申请日: | 2017-06-22 |
公开(公告)号: | CN107278891B | 公开(公告)日: | 2019-06-28 |
发明(设计)人: | 郑唐春;张启翔;卓孝康;孙丽丹;袁存权;程堂仁;王佳 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01C1/08 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;姚自奇 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种杏梅组织培养快速繁殖方法,其特征在于,包括:以当年生杏梅种子为外植体,经消毒、冷藏、启动培养后,将无菌苗子叶和/或嫩茎接种在分化培养基上,培养3-4周;获得不定芽后,将不定芽转移至抽茎培养基上,继续培养2-3周;待丛生苗长至3-4cm长时,将丛生苗转接入生根培养基上,培养2-3周;然后将生根苗移栽、炼苗后,正常培养;
种子冷藏处理方法包括:将消毒后的种子转接入冷藏培养基中,一个组培容器中放置6-7枚,种子与种子之间间隔1-2cm,并用封口膜封口;将组培容器放置于4℃冰箱黑暗处理培养3-4周;启动培养方法包括:将冷藏处理后的种子转移至新鲜的启动培养基中,在组织培养室中培养2-3周,直到种子萌发;培养环境如下:温度23±2℃,16h光照/8h黑暗,光照强度2500lux-3000lux;
所用冷藏培养基为:1/2 MS培养基+蔗糖10-20g/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0;
所用启动培养基为:MS培养基+蔗糖20-25g/L+6-BA 0.10-0.30mg/L+NAA 0.05-0.25mg/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0;
所述分化培养基为:QL培养基+蔗糖20-30g/L+6-BA 0.25-0.50mg/L+NAA 0.05-0.10mg/L+IBA 0.05-0.10mg/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0;
所述抽茎培养基为:QL培养基+蔗糖20-25g/L+6-BA 0.10-0.20mg/L+NAA 0.05-0.10mg/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0;
所述生根培养基为:1/2MS培养基+蔗糖20-25g/L+IBA 0.15-0.30mg/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,对所述外植体进行消毒的步骤:选用完整杏梅种子为外植体,室内流水冲洗30min后,在无菌条件下,利用含0.03%Tween-20的2%次氯酸钠消毒30min,再利用无菌水清洗3-4遍,铺于无菌滤纸上晾干。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所用移栽、炼苗方法包括将获得的生根苗,移栽至含10%珍珠岩的草炭土基质中,罩瓶炼苗1周后,正常培养。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述移栽与炼苗方法包括:生根培养2-3周后,将生根苗移栽至含10%珍珠岩的草炭土基质中,将组培瓶倒扣至移栽苗上,罩瓶培养1周后,保持空气湿度为60%-70%,去瓶正常培养。
5.根据权利要求1-2、4任一项所述的方法,其特征在于,所用冷藏培养基为:1/2MS培养基+蔗糖10g/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0;和/或,
所用启动培养基为:MS培养基+蔗糖25g/L+6-BA0.25mg/L+NAA 0.05mg/L+琼脂5.8g/L,pH值5.8-6.0;和/或,
所述分化培养基为:QL培养基+蔗糖25g/L+6-BA 0.50mg/L+NAA 0.10mg/L+IBA0.05mg/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0;和/或,
所述抽茎培养基为:QL培养基+蔗糖25g/L+6-BA 0.20mg/L+NAA 0.10mg/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0;和/或,
所述生根培养基为:1/2MS培养基+蔗糖20g/L+IBA 0.30mg/L+琼脂适量,pH值5.8-6.0。
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