[发明专利]用于测定烤烟叶挥发油溶液浓度的自然对数标准曲线建立方法

说明书

技术领域

本发明属于烟叶挥发油测定技术领域，尤其涉及一种用于测定烤烟叶挥发油溶液浓度的自然对数标准曲线建立方法。

背景技术

烟叶挥发油是具有挥发性的植物性油状物，其成分包括：醇类、酯类、酸类、醛类、酮类、酚类、醚类和萜烯烃、芳香烃类等许多成分，其中萜类、烯类等物质能吸收紫外光。烟叶挥发油易溶于有机溶剂、能随水蒸气蒸馏挥发而不被破坏，可以通过蒸馏萃取的方法提取获得。烟叶挥发油是体现烟叶优良商品特性的重要物质。了解烤烟叶中挥发油含量的高低对于认识烟叶品质有重要帮助。称重法是目前应用较多的挥发油定量方法，其过程是将烟叶挥发油经水蒸气蒸馏和有机溶剂萃取后进行脱水干燥和有机溶剂挥发，最后称出残余物的重量。

具体步骤如下：

1)首先用同时蒸馏萃取法获得溶解于二氯甲烷中的烟叶挥发油并将其转移到已知重量的容器内(重量W1)；

2)在室温常压条件下挥发或在减压条件下蒸馏使二氯甲烷溶剂挥发散尽；

3)称量出容器与挥发油的共同重量(重量W2)；

4)用“W2-W1”计算出提取得到的挥发性半挥发性物质量。

但上述方法都具有测定工作时间周期长、操作环节干扰因素较多、测定结果重复性欠佳等不足。紫外分光光度法在多种植物挥发油研究中有较为广泛应用，表现出简便、快速、准确、低成本等优势；但利用紫外分光光度法测定烤烟挥发油浓度的方法尚未见报道。

综上所述，现有技术存在的问题是：

目前的“称重法”烟叶挥发油测定方法的不足在于：工作量大、工作时间周期长通常需要8个小时以上，工作环节多、易产生误差。原因如下：

步骤1)和3)的称重操作都涉及到物体的恒重测定，需要对物体进行烘干除水，此操作耗时2-3小时、期间易发生控温不当造成挥发油受热挥发、导致重量损失；若采用在常温下、装有硅胶干燥剂的干燥器中进行平衡干燥法除水，则耗时在24小时左右。

其步骤2)中若以“室温常压条件下使二氯甲烷挥发散尽”则耗时可长达24小时，测定周期时间长；若以“减压条件下蒸馏使二氯甲烷挥发散尽”则易使挥发油组分挥发、导致重量损失。

因此，采用“称重法”测定挥发油时必须设置多个重复样本才能有效降低测定误差，但这样会大大增加工作量。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于测定烤烟叶挥发油溶液浓度的自然对数标准曲线建立方法。

本发明(一种用于测定烤烟叶挥发油溶液浓度的自然对数标准曲线建立方法)是这样实现的，所述用于测定烤烟叶挥发油溶液浓度的自然对数标准曲线建立方法以分光光度法测定出不同浓度烤烟挥发油溶液的紫外光谱，找出特征吸收峰所在的波长范围224nm-245nm；再以梯度溶液的浓度作自变量、以其在224nm-245nm内各波长下对应的紫外吸光度作因变量，求二者间的求它们的自然对数形式拟合模型，选出决定系数R²值最高、R²且大于0.99的自然对数拟合模型作为标准曲线。

所述用于测定烤烟叶挥发油溶液浓度的自然对数标准曲线建立方法包括以下步骤：

步骤一，提取烤烟挥发油：以二氯甲烷作为溶剂、用同时蒸馏萃取法提取烤烟挥发油，经无水硫酸钠脱水和室温常压条件下二氯甲烷溶剂挥发后，再将待测物放入常温下、装有硅胶干燥剂的干燥器中24小时、以去除其微量水，最后称得烤烟挥发油重量；

步骤二，梯度溶液的制备：将上步所获得的烤烟挥发油用二氯甲烷进行复溶、定容得到母液并计算出其准确的浓度，母液再经分取、稀释、定容，得到由5-6个不同浓度溶液组成的梯度溶液；

步骤三，测定梯度溶液的OD₂₂₈：用紫外分光光度计逐一测定上步中配制的梯度溶液在228nm波段处的吸光度；

步骤四，建立自然对数标准曲线：将烤烟挥发油梯度溶液的浓度作为自变量、对应的OD₂₂₈作为因变量，求得二者的自然对数形式的拟合模型作为标准曲线；此自然对数标准曲线可用于求得烤烟挥发油梯度溶液的浓度。

进一步，所述用于测定烤烟叶挥发油溶液浓度的自然对数标准曲线建立方法以梯度溶液的浓度作自变量、以其在波长228nm处的吸光度OD₂₂₈作因变量，求二者间的自然对数形式的拟合模型以此作为测定烤烟叶挥发油浓度的标准曲线。公式中

y：挥发油溶液在228nm处的吸光度---OD₂₂₈(指数，因变量)