[发明专利]7-羟基香豆素吡唑啉衍生物在制备稳定动脉硬化斑块药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种香豆素吡唑啉衍生物的药物用途，尤其涉及7-羟基香豆素吡唑啉衍生物即3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮在制备稳定动脉硬化斑块药物中的应用。

背景技术

3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮的结构式为：

分子式：C₂₄H₁₈N₂O₃

分子量：382.1317，性状：固体粉末

香豆素是自然界中重要的一类天然有机化合物，具有多种药理活性，其作用机理主要有清除氧自由基，阻断脂质过氧化反应，抑制钠、钙等离子通道，调节人体内细胞因子、黏附分子、酶等蛋白的表达等。以7-苄氧基香豆素为基础合成的4-席夫碱-7-苄氧基香豆素及其衍生物体外抑制DPPH的作用强于丁羟甲苯和叔丁基羟基茴香醚。一系列香豆素类似物可体外抑制DPPH和脂质过氧化反应，并有一定的抗炎作用。研究表明香豆素衍生物可以抑制ROS的作用，保护细胞对抗ROS介导的蛋白质损伤，苯环上羟基数目与其对ROS的抑制有关。此外，香豆素中具有儿茶酚基，在自由基清除和抑制脂质过氧化中发挥重要作用，吡喃酮环增强其抗氧化作用。

吡唑啉衍生物是一类非常重要的含氮五元杂环化合物，具有优良的生物活性和重要的应用，可用作抗菌消炎、止痛、抗癌和抗惊厥等药物。某些具有抗高血压和抗抑郁活性的药物分子具有吡唑啉结构单元，该类化合物具有显著的抑制低密度脂蛋白氧化等作用。吡唑啉衍生物对由单氨氧化酶比例失调引起的疾病的治疗研究具有重要的意义。此外，一些多取代的吡唑啉衍生物具有良好的荧光性质，可作为分子探针和荧光开关等。

基于香豆素和吡唑啉衍生物的多种生物活性，设计开发能够抑制氧化损伤进而防止动脉粥样硬化的新型药物具有重大意义。经权威机构检索，有关3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮的生物活性，尤其在稳定动脉硬化斑块中的研究，目前国内外尚未见报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明要解决的问题是提供一种3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮在制备稳定动脉硬化斑块药物中的应用。

本发明所述3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮在制备稳定动脉硬化斑块药物中的应用。其中：有效稳定动脉硬化斑块的3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮的剂量1mg/kg/day。所述小鼠优选是apoE^-/-小鼠。

本发明提供的3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮为研制开发稳定动脉硬化斑块的药物奠定了基础。本发明提供的3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮还可作为一种有效的工具，用于动脉硬化斑块不稳定的分子机制的研究。

为了更好地理解本发明的实质，下面用3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮的药理实验及结果来阐明其在制备稳定动脉硬化斑块药物中的用途。

采用细胞生物学和分子生物学的方法，观察本发明所述3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮在稳定动脉硬化斑块中的作用。其中所述3-(1,5-二苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)-7-羟基-2H-色烯-2-酮在以下实验中简称HCP1。

1.HCP1对动脉硬化斑块组成成分的影响

体外实验表明HCP1可以有效地抑制饥饿、氧化性低密度脂蛋白等刺激诱导的血管内皮细胞的凋亡，保护血管内皮细胞(见附图1)。取动脉硬化模型小鼠apoE^-/-小鼠作为实验材料，检测HCP1处理对动脉硬化斑块组成成分的影响。

对主动脉根冰冻切片进行Masson染色检测斑块中胶原的含量；进行免疫荧光法检测斑块中平滑肌细胞、具有促炎性的M1型巨噬细胞以及具有抗炎性的M2型巨噬细胞的含量；利用原位明胶酶谱法检测斑块中MMP2/9的活性。