[发明专利]一种共表达NDV HN和IBDV VP2基因的HVT的构建及其应用

说明书

本发明涉及构建表达新城疫病毒HN基因的重组火鸡疱疹病毒rHVT‑HN株，该重组病毒可以用于制备载体疫苗预防马立克氏病和鸡新城疫病。本发明同时利用rHVT‑HN株进一步构建了共表达新城疫病毒HN基因和传染性法氏囊病毒VP2基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及其应用。本发明构建的一种重组火鸡疱疹病毒rHVT‑HN‑VP2株，是将新城疫病毒HN基因和传染性法氏囊VP2基因的表达盒重组到HVT中获得的重组病毒，该重组病毒可作为生产毒种用于制备病毒活载体疫苗，用于制备的载体疫苗不仅可以预防马立克氏病，还可以预防鸡新城疫和传染性法氏囊病。

技术领域

本发明涉及一种共表达NDV HN和IBDV VP2基因的HVT的构建及其应用。属于动物生物制品学领域，

背景技术

鸡马立克氏病(Marek`s Disease，MD)是由属于细胞结合性疱疹病毒B群的鸡马立克氏病毒(Marek`s Disease Virus，MDV)引起鸡的一种最常见的淋巴细胞增生性疾病，以外周神经、虹膜、皮肤、肌肉和各内脏器官的淋巴样细胞浸润、增生和肿瘤形成为特征。

根据MDV的三种血清型，目前商品化MDV疫苗分为致弱的Ⅰ型CVI988/Rispens株、无致病性的Ⅱ型SB1株和Ⅲ型火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey，HVT)FC126株。致弱的Ⅰ型CVI988/Rispens株对MD保护效果好，但其作为严格的细胞结合型病毒，必须液氮保存运输，极大的增加了疫苗成本。HVT可以冻干保存，节约了疫苗成本，相对于其它病毒载体，MDV作为最有潜力的疫苗载体，其突出的优点体现在：MDV是严格的细胞结合型病毒，构建的载体疫苗不受母源抗体的干扰，克服了众多活病毒载体疫苗的缺陷；MDV分子大小为180kb左右，能够容纳较大片段基因的插入，而不影响重组病毒的稳定性；MDV疫苗适合早期免疫，对多数病毒特别是免疫抑制性病毒疫苗的研发带来了曙光。基于HVT构建病毒活载体疫苗不仅具有上述优点，还可以实现一苗两防、一苗多防，具有广阔的市场前景。

发明内容

本发明的目的是提供了一种重组火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)rHVT-HN-VP2株，其实际上是在马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)血清Ⅲ型火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)的基础上，将新城疫病毒(Newcastle diseasevirus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(Haemagglutinin-neuraminidase，HN)基因的表达盒和传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus，IBDV)的VP2基因表达盒重组到HVT中，获得了一种全新的重组火鸡疱疹病毒rHVT-HN-VP2，该疫苗不仅可以预防MD，同时还能够预防新城疫(ND)和传染性法氏囊病(IBD)。

本发明的技术方案

1.一种表达NDV HN基因的重组火鸡疱疹病毒，其特征在于该表达NDV HN基因的重组火鸡疱疹病毒被命名为一种重组火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey)rHVT-HN株，该毒株已于2017年06月07日送北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏编号为：CGMCC No.14292。

2.本发明所述的一种表达NDV HN基因的重组火鸡疱疹病毒的构建，其特征在于：将NDV HN基因表达盒重组到HVT基因组中，重组位点为HVT(GenBank:AF291866.1)基因组的位于HVT087-HVT088基因之间的US2区域，该表达盒的基因序列如序列1所示。

3.本发明所述的一种表达NDV HN基因的重组火鸡疱疹病毒的应用，其特征在于该重组毒株在鸡体中诱导抗马立克氏病和新城疫的保护性免疫中的应用。

4.本发明所述的一种表达NDV HN基因的重组火鸡疱疹病毒的应用，其特征在于该重组毒株作为生产毒株在动物疫苗株的应用。