[发明专利]一株用于脱色和絮凝的海洋细菌及其脱色絮凝剂制法有效
申请号: | 201710476290.0 | 申请日: | 2017-06-21 |
公开(公告)号: | CN107236688B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 穆军;崔霞;王玉霞;穆思源;阳广凤;冯丽娟 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P19/04;C12R1/01 |
代理公司: | 北京国翰知识产权代理事务所(普通合伙) 11696 | 代理人: | 吕彩霞 |
地址: | 316000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 脱色 絮凝 海洋 细菌 及其 制法 | ||
1. 一株用于脱色和絮凝的海洋细菌,其特征在于:所述的海洋细菌保藏号为CGMCCNo. 12914。
2.根据权利要求1所述的一株用于脱色和絮凝的海洋细菌,其特征在于:所述的海洋细菌的筛选方法为:采集新鲜菲律宾蛤仔,放入无菌水中吐泥,取1ml泥,采用梯度稀释倒平板分离和划线纯化,经活性测试筛选出具有高絮凝和脱色活性的菌株JP。
3.权利要求1或2所述的一株用于脱色和絮凝的海洋细菌的脱色絮凝剂制法,其特征在于:包括以下步骤:
1)种子液培养:将保藏号为CGMCC No. 12914的海洋细菌接种于斜面培养基,恒温培养后,加入无菌水,振荡制得种子液;
2)扩大发酵培养:在液体发酵培养基中接入种子液,恒温摇床培养;所述液体发酵培养基为斜面培养基去除琼脂;
3)胞外多糖提取:将发酵完成的菌液离心,取上清液,在上清液中加入乙醇,静置后离心取沉淀,真空干燥得胞外多糖粗制品;
4)精制:在胞外多糖粗制品中加水,振荡后加入乙醇,静置后离心取沉淀,真空干燥得到海洋细菌脱色絮凝剂;
所述的斜面培养基成分及其浓度为:葡萄糖10-25g/L、尿素0.43-0.52g/L、硫酸铵0.18-0.24g/L、酵母膏0.4-0.6g/L、磷酸氢二钾1.25-5 g/L、磷酸二氢钾0.5-2g/L、琼脂12-16g/L和余量陈化海水或人工海水;调节pH为7.2-7.4,115-121℃高压灭菌20-30min,其中,所述人工海水配方为:氯化钠25.0g/L、氯化镁2.0g/L、硫酸镁3.2g/L、氯化钙1.2g/L、碳酸氢钠0.2g/L、氯化钾0.7g/L、溴化钠0.06g/L、硼酸0.06g/L、硅酸钠0.0024g/L、磷酸0.002g/L、六氯化二铝0.013g/L、氨水0.002g/L、硝酸锂0.0013g/L、蒸馏水余量。
4.根据权利要求3所述的一株用于脱色和絮凝的海洋细菌的脱色絮凝剂制法,其特征在于:所述的步骤1中培养温度为22-27℃,培养时间为24-72h,培养基与无菌水体积比为1:0.7-1.3。
5.根据权利要求3所述的一株用于脱色和絮凝的海洋细菌的脱色絮凝剂制法,其特征在于:所述的步骤2中每100ml液体发酵培养基接入0.2-0.5ml种子液,发酵温度为22-27℃,摇床速率为120-140r/min,发酵培养时间为3-4d。
6.根据权利要求3所述的一株用于脱色和絮凝的海洋细菌的脱色絮凝剂制法,其特征在于:所述的步骤3中乙醇体积为上清液体积的3-6倍,在2-5℃下静置10-18h。
7.根据权利要求3所述的一株用于脱色和絮凝的海洋细菌的脱色絮凝剂制法,其特征在于:所述的步骤4中粗制品体积为水的1-2倍,乙醇体积为水溶液体积的3-6倍,乙醇温度为2-5℃。
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