[发明专利]与南瓜蔗糖/葡萄糖比值主效QTL紧密连锁的SNP分子标记及其应用有效
申请号: | 201710474621.7 | 申请日: | 2017-08-28 |
公开(公告)号: | CN107365835B | 公开(公告)日: | 2018-02-23 |
发明(设计)人: | 钟玉娟;黄河勋;罗少波;李俊星;周洋洋;谢大森 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院蔬菜研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司44205 | 代理人: | 许飞 |
地址: | 510640 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 南瓜 蔗糖 葡萄糖 比值 qtl 紧密 连锁 snp 分子 标记 及其 应用 | ||
1.可识别或扩增与南瓜蔗糖/葡萄糖比值主效QTL位点紧密连锁的SNP分子标记的分子探针或引物对,所述分子标记为分子标记26139或分子标记13328,定位于中国南瓜19号连锁群上,分别位于蔗糖/葡萄糖基因两侧;其中,分子标记26139包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或其同源SNP序列,SEQ ID NO.1所示序列自5’端起第260位碱基是SNP位点,其碱基为G或C;分子标记13328包含SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或其同源SNP序列,SEQ ID NO.2所示序列自5’端起第25位碱基是SNP位点,其碱基为A或C。
2.根据权利要求1所述的分子探针或引物对,其特征在于:引物对为dCAPS引物对。
3.根据权利要求2所述的分子探针或引物对,其特征在于:用于检测分子标记26139的dCAPS引物对的核苷酸序列如下所示:
F1 :5’- TCGAATCCTGTTTCTGTTTGAAT -3’ (SEQ ID NO.3),
R1 :5’- TATGGTATAATGAAATGGCCGCT -3’(SEQ ID NO.4),
其对应的限制性核酸内切酶为BsrBI。
4.根据权利要求2所述的分子探针或引物对,其特征在于:用于检测分子标记13328的dCAPS引物对的核苷酸序列如下所示:
F1 :5’- GAAGTGTTGGAACTCAAACATCTG -3’ (SEQ ID NO.5),
R1 :5’- TCCCTTATTGGTGTTCTTCTGAAC -3’(SEQ ID NO.6),
其对应的限制性核酸内切酶为Hpy188I。
5.识别或检测与南瓜蔗糖/葡萄糖比值主效QTL位点紧密连锁的SNP分子标记的分子探针或引物对在选育高蔗糖/葡萄糖比值辅助育种中的应用,所述分子标记为分子标记26139或分子标记13328,定位于中国南瓜19号连锁群上,分别位于蔗糖/葡萄糖基因两侧;其中,分子标记26139包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或其同源SNP序列,SEQ ID NO.1所示序列自5’端起第260位碱基是SNP位点,其碱基为G或C;分子标记13328包含SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或其同源SNP序列,SEQ ID NO.2所示序列自5’端起第25位碱基是SNP位点,其碱基为A或C。
6.一种用于南瓜高蔗糖/葡萄糖比值辅助育种的试剂盒,其包括识别或扩增与南瓜蔗糖/葡萄糖比值主效QTL位点紧密连锁的SNP分子标记的分子探针或引物对,所述分子标记为分子标记26139或分子标记13328,定位于中国南瓜19号连锁群上,分别位于蔗糖/葡萄糖基因两侧;其中,分子标记26139包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或其同源SNP序列,SEQ ID NO.1所示序列自5’端起第260位碱基是SNP位点,其碱基为G或C;分子标记13328包含SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或其同源SNP序列,SEQ ID NO.2所示序列自5’端起第25位碱基是SNP位点,其碱基为A或C。
7.一种南瓜辅助育种的方法,包括提取南瓜基因组DNA,检测与南瓜蔗糖/葡萄糖比值主效QTL位点紧密连锁的SNP分子标记的类型,根据SNP类型确定南瓜品种蔗糖/葡萄糖比值高低,其中,所述分子标记为分子标记26139或分子标记13328,定位于中国南瓜19号连锁群上,分别位于蔗糖/葡萄糖基因两侧;其中,分子标记26139包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或其同源SNP序列,SEQ ID NO.1所示序列自5’端起第260位碱基是SNP位点,其碱基为G或C;分子标记13328包含SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或其同源SNP序列,SEQ ID NO.2所示序列自5’端起第25位碱基是SNP位点,其碱基为A或C。
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