[发明专利]一种灵芝菌种复壮方法

权利要求书

1.一种灵芝菌种复壮方法，其特征在于：包括灵芝菌种的制备、一次培养和二次培养。

2.根据权利要求1所述的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

（1）灵芝菌种的制备：采用三代及三代以内的健壮的灵芝个体组织分离提取母种，置于培养基中培养10～15天，得灵芝菌种；

（2）一次培养：取小米粉，加水拌湿使得小米粉的含水量为50-60%的小米粉培养基，将灵芝菌种置于小米培养基中，于20-30℃下培养8-12天后，得一次培养灵芝菌种；

（3）二次培养：将一次培养灵芝菌种转入装有培养基的试管中，塞入试管塞，于25-28℃培养，待菌丝生长满试管时停止培养，即可。

3.如权利要求2所述的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按重量份计算，主要由葡萄糖15-25份、酵母膏3-5份、土豆180-220份、蛋白胨1.5-2.5份、琼脂15-25份、细胞分裂素0.3-0.5份、鱼腥草10-20份、苦参1-10份、九里香1-10份和青天葵5-15份制成。

4.如权利要求3所述的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按重量份计算，主要由葡萄糖18-22份、酵母膏3-5份、土豆190-210份、蛋白胨1.8-2.2份、琼脂18-22份、细胞分裂素0.3-0.5份、鱼腥草13-17份、苦参3-7份、九里香3-7份和青天葵8-12份制成。

5.如权利要求4所述的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按重量份计算，主要由葡萄糖20份、酵母膏4份、土豆200份、蛋白胨2.0份、琼脂20份、细胞分裂素0.4份、鱼腥草15份、苦参5份、九里香5份和青天葵10份制成。

6.如权利要求4-5中任一项所述的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按下述步骤制备：

（1）取鱼腥草、苦参、九里香和青天葵，加6-8倍量水，煎煮2-3h，过滤，取滤渣烘干后，粉碎成细颗粒，得A品；

（2）土豆切片，加5-7倍量水煮沸20-30分钟，过滤，滤渣加5-7倍量水继续，加热至50-60℃，得B品；

（3）B品中依次加入葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、细胞分裂素、A品和琼脂，边加边搅拌，搅匀后，得C品；

（4）C品分装至180ml试管的1/5，硅胶塞密封，6-8支用报纸包好，120-122℃下灭菌20-30min后，冷却至50-60℃，倾斜5-15度放置于20-35℃的烘箱中，放置24-48小时后，取出，即得。

7.如权利要求6所述的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按下述步骤制备：

（1）取鱼腥草、苦参、九里香和青天葵，加7倍量水，煎煮2.5h，过滤，取滤渣烘干后，粉碎成细颗粒，得A品；

（2）土豆切片，加6倍量水煮沸25分钟，过滤，滤渣加6倍量水继续，加热至50-60℃，得B品；

（3）B品中依次加入葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、细胞分裂素、A品和琼脂，边加边搅拌，搅匀后，得C品；

（4）C品分装至180ml试管的1/5，硅胶塞密封，7支用报纸包好，120-122℃下灭菌25min后，冷却至50-60℃，倾斜10度放置于20-35℃的烘箱中，放置36小时后，取出，即得。