[发明专利]用于通过利用所有可用片段改进分段反应单元的装载容量的系统和方法

说明书

一种用于分析样本的方法包含在多片段反应单元的第一片段中捕获第一离子包；在所述多片段反应单元的第二片段中捕获第二离子包；和在所述多片段反应单元的第三片段中捕获第三离子包。所述第一、第二和第三离子包中的至少一个包含前驱体离子，且所述第一、第二和第三离子包中的至少另一个包含试剂离子。所述方法进一步包含混合所述反应单元内的所述第一、第二和第三离子包以引起所述前驱体离子与所述试剂离子之间的反应以形成产物离子。

技术领域

本发明大体上涉及包含用于通过利用所有可用片段改进分段反应单元的装载容量的系统和方法的质谱学领域。

背景技术

气相离子/离子反应已经论证为用于在生物分析中通过特定设施探测及操控分析物离子的灵活方式。举例来说，用以对分析物离子进行碎裂的分析物离子与反应物离子之间的反应可经由观测碎裂质荷比及碎裂操作模式提供结构信息。本领域中已知用于离子-离子反应的各种技术，例如电子转移解离(ETD)、负电子转移解离(nETD)、质子转移反应(PTR)。

ETD及nETD为在质谱仪中对离子进行碎裂的方法。类似于电子捕获解离，ETD通过转移来自反应物的电子而诱发前驱体阳离子的碎裂操作。ETD使用自由基阴离子，例如蒽、荧蒽或偶氮苯，而非利用自由电子。类似地，nETD通过将来自前驱体阴离子的电子转移到自由基阳离子反应物而诱发碎裂操作。ETD及nETD对于更高电荷状态离子(z2)均可作用良好，然而，相对于碰撞诱发解离(CID)，ETD对于更长肽或甚至完整蛋白质的碎裂操作为有利的。

ETD可适用于肽或蛋白质的识别。ETD沿着肽骨架随机分解。此主要产生补充由CID产生的b及y类型离子的c及z类型碎裂离子，从而提高序列覆盖度及蛋白质识别。当ETD分解肽骨架时，侧链及例如磷酸化的修饰完整保留，从而使得ETD尤其适用于识别修饰位点。此使得技术对于从上到下的蛋白质组研究至关重要。

具有相反极性的前驱体物质与试剂物质可通过使阳离子及阴离子两者保持在离子阱或其它装置中而反应。如同任何化学反应，动力学取决于阳离子及阴离子的浓度。此外，碎裂操作的程度取决于阳离子及阴离子的相对丰度以及反应容器内耗费的时间长度。因此，为了达成前驱体的碎裂操作的所要程度，控制前驱体的量、反应物的量及试剂离子可与前驱体离子及所得碎裂离子反应的时间长度为有利的。

从前文，应了解，存在对于用于将前驱体离子及反应物离子装载在多段式反应单元中的改进系统和方法的需要。

发明内容

在第一方面中，用于分析样本的方法可包含在多片段反应单元的第一片段中捕获第一离子包；在所述多片段反应单元的第二片段中捕获第二离子包；以及在所述多片段反应单元的第三片段中捕获第三离子包。所述第一、第二和第三离子包中的至少一个包含前驱体离子，且所述第一、第二和第三离子包中的至少另一个包含试剂离子。所述方法可进一步包含混合反应单元内的第一、第二和第三离子包以引起前驱体离子与试剂离子之间的反应从而形成产物离子。

在第一方面的各种实施例中，所述多片段反应单元为分段线性离子阱、较高能量解离(HCD)单元、多用途解离单元或其任何组合。

在第一方面的各种实施例中，所述方法可进一步包含将样本供应到离子源及产生前驱体离子。

在第一方面的各种实施例中，所述方法可进一步包含将试剂供应到离子源及产生试剂离子。

在第一方面的各种实施例中，所述方法可进一步包含将产物离子引导到质量分析器以确定产物离子的质荷比。在特定实施例中，所述方法可进一步包含基于产物离子的质荷比识别所述样本的组分。

在第一方面的各种实施例中，第一和第三片段可为多片段反应单元的外部片段及第二片段可为多片段反应单元的中心片段。

在第一方面的各种实施例中，第一和第三离子包可包含试剂离子及第二离子包可包含前驱体离子。