[发明专利]同时检测6种猪病毒的系统及其专用LAMP引物有效
申请号: | 201710467125.9 | 申请日: | 2017-06-19 |
公开(公告)号: | CN107034316B | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
发明(设计)人: | 许俊泉;胥慧;袁向芬;范晓攀;吴绍强;徐洪涛;孙晶华;邓企飞;王彩霞;欧阳兆槐 | 申请(专利权)人: | 北京博奥晶典生物技术有限公司;中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 101111 北京市大兴区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 扩增产物 病毒 数据处理器 成套引物 检测系统 检测 猪繁殖与呼吸综合征病毒 环介导等温扩增 特异性扩增产物 猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒Ⅱ型 猪口蹄疫病毒 猪细小病毒 待测样本 技术支持 快速检测 疫病监测 猪瘟病毒 养殖场 样本 观察 | ||
本发明公开了一种用于同时检测6种猪病毒的系统及其专用LAMP引物。该系统包括检测6种猪病毒的LAMP成套引物和/或LAMP所需的试剂和/或仪器和/或扩增产物数据处理器;所述扩增产物数据处理器用于区分检测6种猪病毒的LAMP成套引物对待测样本进行环介导等温扩增得到的待测样本扩增产物中是否含有特异性扩增产物。本发明提供的6种猪病毒的检测系统及其专用LAMP引物可满足对猪口蹄疫病毒O/A/Asia I型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型、猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病病毒的同时快速检测,检测系统操作简单、结果便于观察,对于猪养殖场的疫病监测将提供强大的技术支持。
技术领域
本发明属于核酸扩增技术领域,涉及一种用于同时检测6种猪病毒的系统及其专用LAMP引物。
背景技术
猪口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)、猪瘟病毒(Classicalswine fever virus,CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive andrespiratory syndrome virus,PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus Ⅱ,PCV-2)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)、猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabiesvirus,PRV),这几种病毒引起的疾病在临床上常呈现出相似的呼吸和繁殖障碍症状,并且常常呈混合感染,给养猪业造成重大损失。然而,常规病原学检测及临床病理变化很难作出准确的判断,尤其是多种病原混合感染时,难以进行早期快速检测,容易产生误判错判。
环介导等温扩增法(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)利用BstDNA聚合酶,在等温条件下进行核酸扩增,具有灵敏度高、特异性强、高效快速的优势,可实现样本的快速准确检测。LAMP技术的核心之一在于引物的设计,针对靶序列的6个区域设计4条特异引物,同时可设计2条环引物用于提高反应效率。适合的LAMP引物可保证扩增反应的灵敏度和特异性。
发明内容
本发明要解决的技术问题是如何同时检测6种常见猪病毒。
本发明提供了6种猪病毒检测的检测系统及其专用LAMP引物。
本发明所提供的检测6种猪病毒的环介导等温扩增的成套引物,为下述六个引物组中的六组、任五组、任四组、任三组、任两组或任一组:用于检测猪口蹄疫病毒O/A/Asia I型的引物组、用于检测猪瘟病毒的引物组、用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型的引物组、用于检测猪圆环病毒Ⅱ型的引物组、用于检测猪细小病毒的引物组、用于检测猪伪狂犬病病毒的引物组。
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