[发明专利]一种主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法

权利要求书

1.一种主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)、制备低免疫原性、高纯度生物活性胶原；

2)、向胶原中加入酸酐，在4～15℃下，搅拌，使胶原酰基化；

3)、向2)中加入糖胺聚糖，拌均匀后，离心，去除气泡，然后灌注到模具中，冷冻干燥，得到具有多孔网络结构的胶原-糖胺聚糖复合海绵；

4)、将胶原-糖胺聚糖复合海绵置于EDC/NHS交联体系中交联，用L-聚赖氨酸调节交联度，室温下摇晃反应一定时间，然后蒸馏水清洗去除残留的交联剂，得到交联的胶原-糖胺聚糖复合海绵；

5)、将交联的胶原-糖胺聚糖复合海绵浸泡在生长因子溶液中，吸附一段时间后，置于模具中，冷冻干燥，得到主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料。

2.如权利要求1所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤1)制得的胶原的质量浓度为0.5％～1.5％。

3.如权利要求1所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中的酸酐为乙酸酐、丙酸酐、丁二酸酐和邻苯二甲酸酐中任意一种，加入酸酐的量为5～20g/100g胶原。

4.如权利要求3所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中酰基化反应的时间为1～6h，反应pH为7～10。

5.如权利要求1所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中的糖胺聚糖为透明质酸、硫酸软骨素、低分子量肝素、硫酸乙酰肝素和壳聚糖中的一种或多种，糖胺聚糖与胶原的质量比为1:8～20。

6.如权利要求5所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中透明质酸的分子量为400～180kDa，硫酸软骨素的分子量为10～40kDa，低分子量肝素的分子量为3000～8000Da，硫酸乙酰肝素的分子量为20～50kDa。

7.如权利要求1所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中EDC/NHS交联体系中溶剂为蒸馏水、50％乙醇、75％乙醇和95％乙醇中的一种，EDC的浓度为0.5～10mmol/L，NHS的浓度为0.125～2.5mmol/L，L-聚赖氨酸的浓度为0.1～5mmol/L。

8.如权利要求6所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中交联反应的时间为6～12h。

9.如权利要求6所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤5)中的生长因子为bFGF、EGF、PDGF、CDGF和IGF-1中的一种或多种，生长因子的浓度为50～150μg/mL。

10.如权利要求6所述的主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的制备方法，其特征在于，所述步骤5)中得到主动引导组织再生修复的仿生胶原基材料的厚度为1～5mm。