[发明专利]阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征血清外泌体蛋白标志物及其应用

说明书

本发明提供了阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征血清外泌体蛋白标志物及其应用。具体来说，本发明提供了蛋白标志物的检测试剂在制备用于检测阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的试剂盒中的应用，其中所述蛋白标志物选自C‑反应蛋白、结合珠蛋白和纤连蛋白，所述试剂盒检测的是受试者血清外泌体中所述蛋白标志物的浓度，其中与正常对照相比，所述受试者血清外泌体中C‑反应蛋白浓度上升、结合珠蛋白浓度上升和/或纤连蛋白浓度下降指示阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的概率上升。本发明还提供了相关的试剂盒和检测系统。血清外泌体来源的上述三种蛋白标志物的浓度变化水平可以用于检测阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征。

技术领域

本发明涉及阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征领域，具体涉及一种与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征相关的血清外泌体蛋白标志物及其应用。

背景技术

在睡眠障碍中，最常见的是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(ObstructiveSleep Apnea-Hypopnea Syndrome，OSAHS)。OSAHS是心脑血管疾病的独立危险因素，也与日间过度嗜睡导致智力衰退、心情变化和机动车事故的增加相关。最新的《睡眠白皮书》显示我国20.4％的成人患有OSAHS。在美国，未经控制的中-重度OSAHS每年会增加个人健康消费2700-3000美元，每年总经济成本达650-1650亿美元。目前我国尚缺乏OSAHS对健康消费影响的研究，但可以肯定的是改善OSAHS症状会极大的减少我国的健康消费和相关疾病的致残致死率。

目前用于诊断OSAHS的方法中一般以多导睡眠图(PSG)作为“金标准”。但是PSG的诊断有如下问题：A.OSAHS的PSG诊断数据需要经过一定技术培训的专业人员来分析解读并由委员会认证的睡眠专家审核，同时睡眠中心的有限性加上扩容需要大量资金投入，并且检测过程复杂，耗时并昂贵，无法满足OSAHS患者大规模临床筛查的需求；B.对于患者来说，该诊断技术不够方便，在医院或者临床设施中过夜床旁检测和大量传感器的佩戴也会影响患者的情绪，进而影响监测结果的准确性。

目前，尚未见到OSAHS的分子标志物用于OSAHS临床诊断的报道。因此，急需寻找简单廉价的，并且能够快速测试OSAHS的分子标志物作为临床诊断或干预指标来指导临床治疗。已报道的OSAHS分子标志物主要来源于OSAHS患者液态活检样品(包括尿液、血液、唾液等)的蛋白、代谢性小分子、miRNA等标志物，其中以蛋白和代谢性小分子两者报道居多^1,2。血液是最常用的临床液体活检样本来源，监测血清或血浆的蛋白组分也成为现在评价疾病易感性、是否患病以及疾病进程的重要手段。目前已经有很多血清/血浆蛋白作为疾病的标志物用于临床诊断。

蛋白质组学等系统生物学技术的飞速发展，极大地推动了组学特征谱在疾病早期诊断中的应用。同样地，通过组学的方式进行筛查是目前最常用的寻找OSAHS疾病生物标志物的策略。然而，目前利用比较蛋白组学的手段进行全血清/血浆的差异蛋白检测和鉴定还有一定难度，其中最困难的就是高丰度血清/血浆蛋白对痕量的差异蛋白信息的掩盖，这些高丰度蛋白包括血清白蛋白(Albumin，35-45mg/ml)、纤维蛋白原(Fibrinogen，2-6mg/ml)、IgG(12-18mg/ml)、转铁蛋白(Transferrin，2-3mg/ml)等。有效地去掉这些高丰度蛋白可以提高检测蛋白的数量和精确度，也能更多地检测出痕量蛋白差异。提取血清/血浆中的亚组分进行蛋白组学分析将有助于降低血清/血浆高丰度蛋白的污染和复杂性。目前，通过血清进行OSAHS和对照人群的比较蛋白组学研究及生物标志物鉴定已经有一些报道。例如，通过比较蛋白组学分析，发现儿童OSAHS患者血清中骨钙蛋白(Osteocalcin)增加³；成人OSAHS患者中C4结合蛋白α-链、玻连蛋白(Vitronectin)等蛋白表达降低，而纤连蛋白(Fibronectin)、ApoB-100、血浆铜蓝蛋白(Ceruloplasmin)、结合珠蛋白(Haptoglobin)和载脂蛋白(Apolipoprotein)M表达增高^4,5。