[发明专利]一种用于检测葡萄球菌磺胺类药物耐药基因的分子标记及其应用

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学领域，涉及一种采用分子生物学手段检测微生物耐药基因的方法，具体为一种用于检测葡萄球菌磺胺类药物耐药基因的分子标记及其应用。

背景技术

随着动物养殖业向规模化、集约化方向发展，饲养密度提高，应激因素增多，为疾病的流行提供了有利条件，导致动物细菌性疾病的危害加重。国内外大量资料表明，多年来由于临床抗生素广泛及不合理的使用，给细菌带来了选择压力，其最终结果是选择性保留了耐药能力强的致病菌，给感染性疾病的治疗带来了严重的危机。细菌耐药性已成为全球关注的热点。

我国已成为世界上细菌耐药性最严重的国家之一。1997年解放军总医院报道大肠埃希菌对环丙沙星的耐药率从1994年的41.9％上升至1997年的60.4％。王红宁、朱力军、高松等的研究表明，鸡源、猪源大肠杆菌对常用抗菌药如氨基糖苷类、氯霉素类、磺胺类等产生的耐药率在38～95％，并且有70.2％以上的菌株是多重耐药；郝秀红、马聪等对临床病原菌的研究发现，大肠杆菌、沙门氏菌以及金葡萄球菌对庆大霉素、头孢唑啉、青霉素的平均耐药率超过50.0％。

分子生物学方法在细菌耐药性方面的应用非常广泛，与传统的表型检测相比，它更能准确反映耐药性的传播和流行趋势。综合比较几种基因检测方法，PCR方法因其操作简单、结果准确可靠、成本较低等优点，在现有技术条件下，该方法在临床上的应用前景将会非常广阔。但是单基因pcr方法的最大不足之处在于检测的指标过于单一，而多重PCR具有高效性，即在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物，或对有多个目标基因进行分型，特别是用一滴血就能检测多种病原体。同时，多重PCR方法经济简便，多种病原体在同一反应管内同时检出，将大大的节省时间，节省试剂，节约经费开支，为临床提供更多更准确的诊断信息。

PCR检测试剂盒能快速、准确地对细菌耐药性进行检测，但目前国内还未见动物源细菌耐药性检测试剂盒的研究和报道。

发明内容

本发明的目的是：为了克服现有技术的缺陷，获得一种快速、稳定的动物源细菌耐药性的检测方法，本发明提供了一种用于检测葡萄球菌磺胺类药物耐药基因的分子标记及其应用。

技术方案：一种用于检测葡萄球菌磺胺类药物耐药基因的分子标记，所述分子标记及其序列为：P1，SEQ ID NO.1～2；P2，SEQ ID NO.3～4；P3，SEQ ID NO.5～6。

优选的，所述分子标记P1、P2和P3的上游引物5，端进行氨基化修饰并附加10个碱基T。

表1分子标记序列