[发明专利]一种酶法制备S-腺苷甲硫氨酸的方法

权利要求书

1.一种酶法制备S-腺苷甲硫氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)在反应罐中生成SAM：

在反应罐中，100L的反应体系为含有底物2.5kg甲硫氨酸、3.5kg腺苷，以及2.5kg六偏磷酸钠、0.37kg氯化钾、1.0kg六水氯化镁、0.3kg一水氯化锰和0.43kg磷酸氢二钠的溶液，配制时均匀搅拌防止出现沉淀，调节pH值至8.0，在反应体系中添加MAT酶600U/L、PPK酶300U/L、ADK酶100U/L、PAP酶300U/L以及AK酶500U/L开始反应，所添加酶均为粗酶液；反应期间控制pH值为8.0，温度为37℃；

反应8小时后，高效液相色谱检测SAM的生成量；

(2)在过滤器中分离酶：

通过超滤方法，将步骤(1)的反应液经过过滤器分离混合酶，过滤器内装膜包，滤出液为分离出酶之后的反应液；

(3)分离产物SAM和其它物质：

使用盐酸调节滤出液的pH值至4.0，在离子交换柱中通过D113大孔阳离子交换树脂，溶液中的SAM、氨基酸等阳离子被吸附，穿出液中主要含有ATP、ADP以及AMP；

使用0-0.8M NaCl梯度洗脱阳离子交换树脂上的SAM；

(4)反应罐中生成SAM的连续反应，即步骤(1)的连续反应：

将步骤(2)中分离出的酶经由过滤器的回流口添加至反应罐，并添加原酶量5-10％的新酶进行反应；将步骤(3)中离子交换穿出液加入至反应罐配制溶液，反应液配制方法同上述步骤(1)，腺苷加入量减少75％；

在37℃、pH为8.0的条件下进行生成SAM的连续反应；8小时后，HPLC检测SAM的生成量。