[发明专利]一种对四种人体体液来源进行鉴定的方法和系统

说明书

本发明提供一种对四种人体体液来源进行鉴定的方法和系统。该方法包括如下步骤：1)提取待鉴定的人体体液样本中的RNA，其中，人体体液样本的可能来源包括外周血、月经血、精液或唾液；2)对RNA中的体液特异性miRNA进行逆转录，并对得到的逆转录产物进行扩增，获得相应的扩增结果，其中，体液特异性miRNA包括miRNA214、miRNA451、miRNA144、miRNA888、miRNA891和miRNA205，同时，对内参基因进行逆转录，并对得到的内参逆转录产物进行扩增，获得内参扩增结果；3)根据扩增结果和内参扩增结果，确定所述人体体液样本的来源。采用上述方法，能够实现对人体体液样本组织属性来源的鉴定，并保证鉴定结果的准确性和可靠性。

技术领域

本发明涉及一种对四种人体体液来源进行鉴定的方法和系统，属于法医学物证鉴定技术领域。

背景技术

在犯罪现场遗留的人源性样本，如外周血、月经血、唾液、精液等，获知其准确的组织属性来源，对于案件定性或重现案发现场意义重大。因此，对犯罪现场生物检材进行组织来源推断一直是法医物证学重要的研究内容。

目前针对人体体液样本组织属性来源的鉴定方法相对较多，包括传统的基于酶促反应或免疫学检测的生化鉴定方法和光谱学鉴定法等。随着分子生物学基础理论及检验技术的迅速发展，研究人员尝试用分子生物学的手段来解决组织来源鉴定问题，以进一步提高检测结果的准确性。目前常用的分子标记物包括信使RNA(messengerRNA，mRNA)、微RNA(MicroRNA，miRNA)、DNA甲基化等。

miRNA是一类广泛存在于真核细胞中、约由18-25个核酸组成的内源性非编码小分子RNA，具有组织特异性高、分子小且不易降解的特点，即便在极端温度、强酸、强碱条件下，其含量和分子结构均无明显变化，满足检测降解检材的需求，成为继mRNA之后的用于解决法医学关注的热点。但是目前采用miRNA作为分子标记物以鉴定人体体液来源的技术还不成熟，特异性较低，影响了检测结果的准确性和可靠性。因此，如何提供一种准确的鉴定方法和系统，以判断人体体液来源成为有待解决的问题。

发明内容

本发明提供一种对四种人体体液来源进行鉴定的方法，通过甄选多种miRNA作为体液异性标记，根据上述体液特异性miRNA在不同人体体液中的相对表达量高低，实现对外周血、月经血、精液和唾液这四种人体体液样本组织属性来源的准确鉴定。

本发明还提供一种对四种人体体液来源进行鉴定的系统，通过该系统能够实现对于人体体液样本组织属性来源的合理准确鉴定。

本发明还提供一种检测体系，该检测体系能够准确获得待鉴定人体体液中体液特异性miRNA经逆转录和扩增后的扩增结果。

本发明还提供一种检测试剂盒，包括上述检测体系。

本发明提供一种对四种人体体液来源进行鉴定的方法，包括以下步骤：

1)提取待鉴定的人体体液样本中的RNA，其中，该人体体液样本的可能来源包括外周血、月经血、精液或唾液；

2)对上述RNA中的体液特异性miRNA进行逆转录，并对得到的逆转录产物进行扩增，获得扩增结果，其中，上述体液特异性miRNA包括miRNA214、miRNA451、miRNA144、miRNA888、miRNA891和miRNA205，

同时，对内参基因进行逆转录，并对得到的内参逆转录产物进行扩增，获得内参扩增结果；

3)根据上述扩增结果和内参扩增结果，确定人体体液样本的来源。